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犬肾细胞系/IgR；MDCK/IgR说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 犬肾细胞系/IgR；MDCK/IgR说明书
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞为MDCK细胞的克隆系。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C6
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

 高效氯氟氰菊酯    分子式：    449.85    分子量：     C23H19ClF3NO3    英文名称：    High efficiency chlorine and fluorine    CAS号：    91465-08-6    
 (S,S)-2-氮杂双环[3,3,0]辛烷-3-羧酸苄酯盐酸盐    分子式：    281.78    分子量：     C15H20ClNO2    英文名称：    (S, S) -2- azabicyclo [3,3,0] octane -3- carboxylic acid benzyl ester hydrochloride    CAS号：    93779-29-4    
 甜菊双糖甙    分子式：    642.734    分子量：    C32H50O13    英文名称：    Steviolbioside    CAS号：    41093-60-1    
 栀子甙    分子式：    388.37    分子量：    C17H24O10    英文名称：    Gardenia    CAS号：    24512-63-8    
 杨梅素    分子式：    318.2351    分子量：    C15H10O8    英文名称：    Red pigment    CAS号：    529-44-2    
 五味子甲素    分子式：    416.50728    分子量：    C24H32O6    英文名称：    A vegetarian    CAS号：    61281-38-7    
 人参皂苷Re    分子式：    947.15388    分子量：    C48H82O18    英文名称：    Ginsenoside Re    CAS号：    52286-59-6    
 牡荆素-2-O-鼠李糖苷    分子式：    578.52    分子量：    C27H30O14    英文名称：    Vitexin rhamnoside -2-O-    CAS号：    64820-99-1    
 黄杨酮碱    分子式：    371.55608    分子量：    C24H37NO2    英文名称：    Boxwood base ketone    CAS号：    4236-73-1    
 番泻苷 B    分子式：    862.73912    分子量：    C43H38O20    英文名称：    The B    CAS号：    128-57-4    
 白花前胡素D     分子式：    426.4624    分子量：    C24H26O7    英文名称：    White flowers D    CAS号：        
 苏丹红7B    分子式：    379.46    分子量：     C24H21N5    英文名称：    Tonyred 7B    CAS号：    6368-72-5    
 7-氯靛红    分子式：    181.58    分子量：     C8H4ClNO2    英文名称：    7- isatin chloride    CAS号：    7477-63-65g    亮绿 SF( 淡黄 )   5mg    生物素化兔 IgG    
肝素    CAS9041-08-1    1g
硫酸卡那干粉    60302-1    1g
1mg    乙酰辅酶 A    
25g    结晶紫    
1mg    金黄色葡萄 V8 蛋白酶    
100U    Therminator II DNA 聚合酶    
木瓜蛋白酶    CAS9001-73-4    5g
CM 交换介质    130422-50    50mL
10 次    质谱兼容型蛋白银染试剂盒    
500mL    L-15 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )    
500 U    天冬氨酸转氨酶    
20 次    双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-EGFP·PI）    
四盐酸精胺    CAS306-67-2    1g
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 中 pH)    81212B-30    30 次
100 次    总抗氧化能力检测试剂盒 (FRAP 法 )    
1mL    绿如蓝染料，PCR     
1g    肝素锂    
100 次    谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒    
卵白蛋白    CAS9000-96-8    1g
β- 乙醇，电泳    100841-1.5    1.5mL
植物 RNA 提取高盐溶液    140402-100    100mL