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更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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狗肾细胞隆突型;MDCK superdome价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
狗肾细胞隆突型;MDCK superdome价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 来源于狗肾细胞MDCK,可以形成隆突。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:6~1:10传代;2~3天1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲胺钠盐(TOOS) 分子式: 331.4 分子量: C12H18NNaO4S·2H2O 英文名称: N- ethyl -3- (2- hydroxy -3-) -N- methyl aniline sodium (TOOS) CAS号: 82692-93-1
正辛基硫醇 分子式: 分子量: 英文名称: N-octyl mercaptan CAS号:
乙二醇丁 分子式: 118.17 分子量: C6H14O2 英文名称: Ethylene glycol butyl ether CAS号: 111-76-2
1-乙酯甲基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐 分子式: 分子量: 英文名称: 1- ethyl methyl -3- six f CAS号: 503439-50-7
无花果蛋白酶 分子式: 分子量: 英文名称: Fig protease CAS号: 819
粉唑醇 分子式: 301.29 分子量: C16H13F2N3O 英文名称: Flutriafol CAS号: 76674-21-0
奥沙利铂 分子式: 397.3 g/mol 分子量: C8H14N2O4Pt 英文名称: Oxaliplatin CAS号: 63121-00-6
氧化萎锈灵 分子式: 267.3 分子量: C12H13NO4S 英文名称: Oxycarboxin CAS号: 5259-88-1
紫草素 分子式: 288.3 分子量: C16H16O5 英文名称: Shikonin CAS号: 517-89-5
盐酸药根碱 分子式: 373.8301 分子量: C20H20ClNO4 英文名称: Hydrochloric acid CAS号: 6681-15-8
五内脂 分子式: 468.677 分子量: C30H44O4 英文名称: Body fat CAS号: 136040-43-2
人参皂苷Rb3 分子式: 1079.2685 分子量: C53H90O22 英文名称: Ginsenoside Rb3 CAS号: 68406-26-81000μL 小鼠抗 T7 标签单抗
胰蛋白酶,质谱 131029-100 100μg
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制剂 60901-0.3 0.3mL
10g 土盐
500mL F12K 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )
1g 石榴红硫
250U Red-KOD DNA 聚合酶
吸附树脂 XAD7 CAS37380-43-1 100g
古细种属鉴定 PCR Mix 1 131131A-100 100 次
100 次 细 RNAout
50 次 革氏阳性细质粒 DNAout
1g 1,4- 双 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯
50 次 柱式 G+细 RNAout
DEAE 葡聚糖凝胶 A-25 CAS12609-80-2 25g
JM83 种 12-145 1mL
100g 盐酸胍
500mL IMDM 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )
25g 抗坏血酸
1mg 生物素化的碱性磷酸酶 (AP)
苏木色精 CAS517-28-2 10g
红溶液 ,100mg/mL 120690-10 10mL
25g 乙烯利