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产品型号:
更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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兔肾细胞;RK13价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
兔肾细胞;RK13价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 RK13细胞初期建系于1959年,衍生于5周龄兔的胰酶消化肾细胞。该细胞系对风疹病毒(Rubella virus)敏感,病毒感染产生致细胞病变(CPE)。研究发现RK13细胞可作为多种病毒的敏感宿主,支持B病毒、单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus)、伪狂犬病毒(Pseudorabies virus)、痘苗病毒(Vaccinia virus)、兔痘病毒(Rabbitpox virus)、粘液瘤病毒(Myxoma virus)和猴腺病毒(Simian adenoviruses)的增殖。另外
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C186
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
对叶百部碱 分子式: 375.5 分子量: C22H33NO4 英文名称: Tuberostemonine CAS号: 6879/1/2
刺五加皂苷B 分子式: 1189.35348 分子量: C58H92O25 英文名称: Saponins B CAS号: 114902-16-8
新亚甲基蓝24 分子式: 347.91 分子量: C18H22ClN3S 英文名称: New methylene blue 24 CAS号: 1934-16-3
直接绿B 分子式: 812.7 分子量: C34H22N8Na2O10 英文名称: Direct green B CAS号: 4335/9/5
水溶苯胺兰 分子式: 分子量: 英文名称: Water soluble aniline blue CAS号:
(INT)碘硝基四唑紫 分子式: 505.71 分子量: C19H13N5O2ICl 英文名称: (INT) four CAS号: 146-68-9
乙酰丙酸钠 分子式: 138.09705 分子量: C5H7NaO3 英文名称: Sodium acetyl propionate CAS号: 19856-23-6
4-羟基-3-己酮 分子式: 116.16 分子量: C6H12O2 英文名称: 4- hydroxy -3- CAS号: 4984-85-4
间苯二酚 分子式: 110.11 分子量: C6H6O2;C6H4-1,3-(OH) 英文名称: Resorcinol CAS号: 108-46-3
苋菜红 分子式: 604.47 分子量: C20H11N2Na3O10 英文名称: Amaranth CAS号: 915-67-3 100 次 溴化乙锭清除剂
20 次 即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子,有 MCS)
小鼠 NK 细胞分离液 1.076 120912-200 200mL
柱式质粒 DNAout 60205-100 100 次
100μg 人基因组 DNA,男性
250mg D- 氨基半乳糖盐
50 次 柱式细 DNAout( 含溶酶 )
200mL 小鼠中性粒细胞分离液 1.100
葡萄糖 -6- 磷酸脱氢酶测试盒 18-0450-24 24 T
三合一 RNA 上样液 ( 含 EB) 3130A-1.5 1.5mL
0.1mg 山羊抗兔 IgG,荧光素 555 标记
100g DNA Sarkosyl( 十二烷基肌氨酸 )
100mL 非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 )
150 次 天净沙 DNA 甲基化修饰试剂盒
工具酶缓冲液 131180-1 1mL
预混型丙烯酰胺 - 甲叉双丙烯干粉 (19:1) 130967-100 100g
2000U T4 核酸内切酶 V
3g 蛋白去除试剂 S
50L Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )
1000μL 小鼠抗 mCherry 标签单抗
葡激酶 130875-100 100μg
dCTP 溶液,100mM 130917-0.5 0.5mL
50 次 通用型 RT-LAMP 试剂盒