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更新时间:2025-06-28
厂商性质:经销商
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盘羊皮肤细胞;ASHS3价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
盘羊皮肤细胞;ASHS3价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性盘羊的耳组织。1997年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
三十四烷 分子式: 478.92 分子量: C34H70 英文名称: Thirty-four alkanes CAS号: 14167-59-0
二乙二醇单丁 分子式: 162.23 分子量: C8H18O3 英文名称: Diethylene glycol monobutyl ether CAS号: 112-34-5
甲基萘 分子式: 142.1971 分子量: C11H10 英文名称: Methyl naphthalene CAS号: 1321-94-4
异恶唑草酮 分子式: 359.32 分子量: C15H12F3NO4S 英文名称: Isoxazole clomazone CAS号: 141112-29-0
硬脂酸红霉素 分子式: 1018.4 分子量: C37H67NO13· C18 英文名称: Erythromycin stearate CAS号: 643-22-1
地米还原物 分子式: 420.47 分子量: C23H29FO6 英文名称: Ground rice reduction CAS号: 7793-38-6
盐酸青藤碱 分子式: 365.85 分子量: C19H23NO4·HCl 英文名称: Sinomenine hydrochloride CAS号: 6080-33-7
地高辛 分子式: 780.94 分子量: C41H64O14 英文名称: Digoxin CAS号: 20830-75-5
亚麻木酚素 分子式: 686.71 分子量: C32H46O16 英文名称: Flax phenol CAS号: 148244-82-0
血根碱 分子式: 332.32946 分子量: C20H14NO4+ 英文名称: Sanguinarine CAS号: 2447-54-31mL SMD1168H 酵母种
小鼠基因组 DNA 131033-100 100μg
Tuner(DE3) 感受态细胞 130562-10 0.1mL×10
1000μL 小鼠抗 T7 标签单抗
5g 甲基橙
100g 氯化
400U NdeI
10 管 种保存液
Forskolin( 苷酸环化酶激活剂 ) 23-0250-1 1mg
非酶多糖清除剂 (DNA ) 111008-50 50 次
5L SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )
0.5mL dNTP 溶液 ( 标记 )
5次 包涵体中量纯化试剂盒
50 次 石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
固蓝 RR 盐 CAS14726-29-5 5g
蛋白折叠试剂盒 131121-100 100 次
20L 长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(2-30KD)
100 次 两栖类和爬行类动物种属鉴定 PCR Mix
1个 15mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)
5mg Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )
100g 聚乙二醇
总抗氧化能力检测试剂盒 (FRAP 法 ) 18-0770-100 100 次
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 ) 70904B-1.5 1.5mL
100U Therminator II DNA 聚合酶
1.5mL 非酶 DNA 清除剂
10g 聚蔗糖 400