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更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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盘羊皮肤细胞;OAM-S1价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
盘羊皮肤细胞;OAM-S1价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性盘羊的皮肤组织。1996年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
碱性蓝G 分子式: 分子量: 英文名称: Alkaline blue G CAS号:
荧光桃红B 分子式: 829.63 分子量: C20H2Br4Cl4Na2O5 英文名称: Phloxine B CAS号: 18472-87-2
氯磷酸二异丙酯 分子式: 200.6 分子量: C6H14ClO3P 英文名称: Two isopropyl chloride phosphate CAS号: 2574-25-6
仲丁基溴化镁 分子式: 161.32 分子量: C4H9BrMg 英文名称: Zhong Dingji bromide CAS号: 922-66-7
靛兰胭脂红 分子式: 分子量: 英文名称: Indigo carmine CAS号:
变色酸 分子式: 320.3 分子量: C10H8O8S2 英文名称: Discoloration acid CAS号: 148-25-4
酸性 S-RL 分子式: 分子量: 英文名称: Acid black S-RL CAS号:
3-羟基-2,4,6-三碘苯甲酸(HTBA) 分子式: 515.81 分子量: C7H3I3O3 英文名称: 3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA) CAS号: 53279-72-4
氯代正丁烷 分子式: 92.57 分子量: C4H9Cl 英文名称: Chlorinated butyl CAS号: 109-69-3植物种属鉴定 PCR Mix 2 131129B-100 100 次
10×100μL XL2-Blue 感受态细胞
5mL 肝素琼脂糖
10g N ,N- 双 (2- 羟乙基 ) 甘氨酸
10 次 柱式血液 mtDNAout,测序
结晶紫 CAS548-62-9 25g
C43(DE3) 种 12-228 1mL
100 次 血液保存和 DNA 纯化套装
48 T 红细胞 NADH 高铁血红蛋白还原酶测试盒
5g 苏丹 B
10 次 糖蛋白染色试剂盒
L- 谷氨酰胺 CAS56-85-9 25g
MAL 指示剂培养基 130898-100 100mL
25g 胰蛋白酶 1:250
100mg 胶原酶Ⅰ型
1g 溴甲酚绿
0.1mg 山羊抗兔 IgG,荧光素 555 标记
氯化硝基四氮唑兰 CAS298-83-9 500mg
小鼠抗 GFP 标签单抗 130580-1000 1000μL
5次 植物线粒体纯化试剂盒 ( 粗提 )
25g L- 精氨
25g QAE 葡聚糖凝胶 A-50
20 μg 哺乳动物双杂交试剂盒