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更新时间:2017-01-23
厂商性质:经销商
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大耳山羊肾细胞;LDG-2价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
大耳山羊肾细胞;LDG-2价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮样,多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性大耳山羊的肾组织。1990年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
500mL L-15 培养基 ( 含 1% 双抗 +10% 小牛血清 )
100mL DNA Tris HCl,1M,pH6.5
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC·PI) 81025-25 25 次
DNA 电泳分子量标准 (3)pBR322/MspI 90602B-50 50 次
5mg 生物素化兔 IgG
50mL 丁基硫介质
5mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚葡萄糖苷
200U Klenow 片段
卵磷脂 ( 蛋黄 ) CAS8002-43-5 10g
胰蛋白酶抑制剂,10mg/mL 100834-10 10mL
30 次 柱式腐殖酸清除剂
1mg MM1-43(FM®1-43)
10μL AP 标记的抗地高抗体
400U RNase 抑制剂 ( 人源 )
5次 天净沙非同位素探针杂交试剂盒
T4 聚核苷酸激酶 120506-200 200U
AMV cDNA *链合成试剂盒 130608-30 30 次
100U Vent DNA 聚合酶
1mL 鲑鱼精 DNA 溶液
10g 马来酸
10μL AP 标记的抗生物素抗体
3,5 二硝基水杨酸 CAS609-99-4 25gM17琼脂/M17 Agar 牛奶和制品中酸菌检测和分离培养 国产/进口 250克
人脉络膜血管细胞*培养基 100mL
肠道菌计数琼脂/结晶紫中性红胆盐葡聚糖琼脂/VRBDA 肠道菌计数和肠杆菌科鉴别 国产/进口 250克
人鼻咽母系细胞 英文名称: CNE-2Z
抗生素Ⅷ号培养基/抗生素8号培养基/Antibiotic Agar NO.8 去甲万古霉素的效价测定 国产/进口 250克
大鼠肾小管上细胞*培养基 100mL
去氧胆酸盐琼脂/脱氧胆酸钠琼脂/DCLA 大肠菌群的平板测定以及肠道菌的选择性培养 国产/进口 250克
Western Blot封闭液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk) 100ml、500ml 100ml、500ml
胰蛋白胨胆盐琼脂/Tryptone Bile Agar 大肠杆菌的膜过滤法选择性培养 国产/进口 250克
S180/小鼠腹水瘤 株 国产
KP-N-NS(人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移)) 5×106cells/瓶×2
NCI-H520(人肺鳞细胞) 5×106cells/瓶×2 gersion