牦牛皮肤细胞；BMU-S1说明书售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员，我们将尽快为您解决。

牦牛皮肤细胞；BMU-S1说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 牦牛皮肤细胞；BMU-S1说明书
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来源于一雄性黑牦牛的皮肤组织。1996年由中国科学院昆明细胞库建立。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
传代方法  1：2传代；3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

YEB Agrobacterium Growth Medium    BR    国产/进口    100克    
人非小细胞肺细胞    英文名称：        NCI-H358    
酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂/YGC琼脂/YGC Agar    食品中霉素及酵母菌总数测定    国产/进口    250克    
大鼠牙细胞*培养基    100mL            
葡萄糖琼脂/Dextrose Agar    肠杆菌科的葡萄糖发酵试验    国产/进口    250克   刺毛鼠肺成纤维样细胞    英文名称：        CWbRL    
亚碲酸盐卵黄增菌液/Egg-Yolk lurite Emulsion    金黄色葡萄球菌的选择性分离；贝尔德-帕克基础配套试剂    国产/进口    50毫升    
SK-MES-1(人肺鳞细胞)    5×106cells/瓶×2            
NCI-H524(人非小细胞肺细胞)    5×106cells/瓶×2            
NR8383(大鼠肺泡巨噬细胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
LS 180(人结肠腺细胞)    5×106cells/瓶×2            
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)    5×106cells/瓶×2            1个    冰袋    
1个    荧光尺    
乙酰丁香酮    CAS2478-38-8    1g
无脊椎动物种属鉴定 PCR Mix    131128H-100    100 次
10mL    X-Gal 溶液，20mg/mL    
10g    甘氨酸二肽    
250mg    新生    
10 次    百万碱基植物 DNAout     
秋水仙素    CAS64-86-8    100mg
BL21-CodonPlus-RIL 种    12-119    1mL
5mL    雪旺细胞生长因子    
10000U    核糖核酸酶 RNase If    
25mg    荧光胺    
10 次    ConA 糖蛋白分离试剂盒    
葡萄糖氧化酶    CAS9001-37-0    10Ku
穿刺培养基    100826-10    10 管
50 次    一站式柱式 miRNAout    
100mL    交联琼脂糖凝胶 2B    
25g    L- 亮氨酸    
60μL    驴抗山羊 IgG，辣根过氧化物酶标记    
萘啶酮酸    CAS389-08-2    5g
小鼠抗 GST 标签单抗    130577-1000    1000μL
K-562(人慢性骨髓性白血病细胞)    5×106cells/瓶×2            
Hela, 人宫颈细胞系                
中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)    10mL            
CFPAC-1(人胰腺细胞)    5×106cells/瓶×2            
小鼠甲状腺上细胞*培养基    100mL            
5637(人膀胱细胞)    5×106cells/瓶×2