大额牛肾细胞；BFR-K1价格售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员，我们将尽快为您解决。

大额牛肾细胞；BFR-K1价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

大额牛肾细胞；BFR-K1价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来源于一雄性新生大额牛的肾组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。 
培养条件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
传代方法  1：2传代；3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 B类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

大鼠气管平滑肌细胞*培养基    100mL            
沙氏BHI琼脂/沙氏脑心浸液琼脂/Sabouraud BHI Agar    真菌检测    国产/进口    250克    
TSCCa(人舌鳞细胞)    5×106cells/瓶×2            
HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞)    5×106cells/瓶×2            
CCDA基础/弯曲杆菌培养基基础/炭孢哌酮脱氧胆酸盐琼脂基础/CCDA Base    弯曲杆菌的分离培养    国产/进口    250克    
THP-1(人髓系白血病单核细胞)    5×106cells/瓶×2            
叙利亚仓鼠肾细胞    英文名称：        BHK    
碳酸氢钠琼脂基础    炭疽杆菌的荚膜培养    国产/进口    250克    
TBST    500ml        国产    
SK-N-MC(人神经上瘤细胞)    5×106cells/瓶×2            
PVDF膜（0.45um）    26.5cm × 3.75m,12cm x 20cm    gersion    12cm x 20cm    
Beta-TC-6(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞)    5×106cells/瓶×2            
mOPC, 小鼠少突胶质前体细胞        gersion        
PC-3(人前列腺细胞)    5×106cells/瓶×2            
Hut-102(人肤T淋巴瘤细胞)    5×106cells/瓶×2            
Caco-2(人结直肠腺细胞)    5×106cells/瓶×2            
EL4(小鼠淋巴瘤细胞)    5×106cells/瓶×2            
小鼠肾动脉内细胞*培养基    100mL  20 次    一站式 GST 标记蛋白质微量纯化套装    
Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )    23-0510-10    10g
柱式酱油 DNAout    130956-10    10 次
10mL    RNA 洗脱液    
100 次    草杆 PCR Mix 4    
1g    硫酸新干粉    
50mL    即用型封堵液 (Nylon )    
Caspase 6 检测试剂盒     140641-50    50 次
DNA 洗脱液    70705-50    50mL
20 次    Southern Marker DL2000( 生物素 )    
10mg    DiI( 细胞膜红色荧光探针 )    
10 次    预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)    
1mL    Tuner(DE3)plysS 种    
3'-RACE 试剂盒    101104-10    10 次
超快非醇核酸沉淀剂    60402-30    30 次
25 次    双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC·PI）    
100mL    大肠杆零诱导培养基    
10mL    TE 缓冲液，PH7.0    
1mL    酵母蛋白酶抑制剂