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更新时间:2017-02-09
厂商性质:经销商
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植物种属鉴定 PCR Mix 7100 次*使用方法:
1. 以 30 uL 的标准 PCR 反应体系为例,如果反应体系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的 PCR 管中,加入下列成分:易错 PCR Mix, 10× 3 uL 易错 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自备 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自备,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 补水到 30 uL
2. 按已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取 5 uL 电泳检查。如果没有优化的 PCR 条件,一般可以先尝试下面的 PCR 条件: PCR 前变性 94℃ 3 分钟易错 PCR 94℃ 1 分钟 45℃ 1 分钟 循环 30 次(见注) 72℃ 1 分钟注:易错 PCR 一般不需要热启动,也不需要在 PCR 结束后做延伸处理。
3. 电泳检测是否得到预计长度的 PCR 产物。
植物种属鉴定 PCR Mix 7100 次*产品及特点:
易错 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功能的特性,在一定条件下(如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错 PCR 和常规 PCR 的比较如下:本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错 PCR 而开发,本产品具有下列特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的*性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% (±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在 PCR 引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易错 PCR 的产物用作下一次易错 PCR 的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
产品介绍:
规格及成分:
IR1
L3619
lambda amp3(lambdaamp3)
mAmetrine1.1
p079 pPNT6(p079pPNT6)
pAcGFP1-N In-Fusion Ready(pAcGFP1NInFusionReady)
pAG416GPD-ccdB-Cerulean(pAG416GPDccdBCerulean)
pAOX1
pBAD/His C(pBADHisC)(60908-660)
pBI221-GFP(pBI221GFP)(60908-761)y
pBP109SVEC4-10(小鼠淋巴结内皮细胞)5×106cells/瓶×2
植物杆菌 Lactobacillus plantarum
虎皮香菇,漏斗香菇 Lentinus tigrinus
人胃腺细胞英文名称:AGS
MG-63, 人骨肉瘤细胞 Human
地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
C4-2(人前列腺细胞)5×106cells/瓶×2
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
假单胞菌 Pseudomonas sp.
CRT(人神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
链霉菌 Streptomyces sp.
VE(人血管内皮细胞)5×106cells/瓶×2
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
BEL-7404(人肝细胞)5×106cells/瓶×2
pCAMBIA0380
pcDNA1.1
pcDNA6.2/nGeneBLAzer-DEST(pcDNA6.2nGeneBLAzerDEST)
pCMV-3Tag-4B(pCMV3Tag4B)
pCMV6-AC-FC-S(pCMV6ACFCS)
pCold II (pColdII )(60908-2340)