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产品型号:
更新时间:2025-06-10
厂商性质:经销商
访问量:179
021-39596320
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
产品属性:
产品名称 | Sf21 (昆虫卵巢细胞) |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X0203 |
名称 Sf21 (昆虫卵巢细胞)
别称 SF21; Sf-21; SF-21; IPLB-SF-21-AE; IPLB-Sf21-AE; IPLB-SF21-AE; IPLB-SF 21AE; IPLB-Sf21AE; IPLB-SF21AE; IPLB-SF-21; IPLB-Sf-21; IPLB-SF 21; IPLB-Sf21; IPLB-SF21
年龄(性别) 蛹
组织来源 卵巢
生长特性 半贴半悬
细胞形态 圆形
背景描述 Sf21细胞是源于雌性草地贪夜蛾蛹的卵巢组织,是Sf9细胞的克隆系;Sf21细胞可以用于昆虫病毒的基础研究和复制杆状病毒表达载体。
生物安全等级 1
生长培养基 TNM-FH+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~26-72 hours
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,100%;
温度:28℃
保藏机构 DSMZ; ACC-119 ECACC; 05022801
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
多粘芽孢杆菌 变形杆菌
蜡状芽孢杆菌蕈状变种 斯氏梭菌
牙龈卟啉单胞菌 黄色长孢链霉菌
缺陷假单胞菌ATCC19146冻干粉 奇异变形杆菌冻干粉
扁柄侧耳 单增李斯特菌
大鼠白介素1受体Ⅱ(IL1R2)elisa检测试剂盒
大鼠白介素1受体Ⅰ(IL1R1)elisa检测试剂盒
大鼠白介素1δ(FIL1δ)elisa检测试剂盒
大鼠白介素1β(IL1β)elisa检测试剂盒
大鼠白介素1α(IL1α)elisa检测试剂盒
Sf21 (昆虫卵巢细胞)大鼠转录因子20(TCF20)elisa检测试剂盒
大鼠转录因子P65(RELA)elisa检测试剂盒
大鼠转醛缩酶(TALDO1)elisa检测试剂盒
大鼠转铁蛋白 TRF elisa检测试剂盒
大鼠转铁蛋白(TF)elisa检测试剂盒
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。