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当前位置:首页产品中心科研细胞细胞系LNCaP clone FGC (前列腺癌细胞)

LNCaP clone FGC (前列腺癌细胞)
产品简介:

LNCaP clone FGC (前列腺癌细胞)公司其它各种产品去离子甲酰胺100mL 间充质干细胞脂防细胞分化生长因子5mL
BLOTTO 溶液100mL 间充质干细胞生长因子5mL
酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL 间充质干细胞生长因子 - 无血淸5mL
酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL 间充质干细胞软骨细胞分化生长因子5mL
Denhardt 溶液,50×

产品型号:

更新时间:2022-04-02

厂商性质:经销商

访问量:250

服务热线

021-39596320

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产品介绍

冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

产品属性:

产品名称

LNCaP clone FGC (前列腺癌细胞)

规格

1×10cells/T25培养瓶

货号

GOY-01X0142

名称    LNCaP clone FGC (前列腺癌细胞) (STR鉴定正确)
别称 LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC

种属 人类

年龄(性别) 男性,50

组织来源 前列腺;左锁骨淋巴结癌转移灶

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离,该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-164010% FBS1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3/

倍增时间 ~32-36小时

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37

致瘤性 Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice.

受体表达情况 androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive

基因表达情况 human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen

注意事项 1)该细胞并不形成一致的单层,而是形成集落。(2)该细胞会使培养基快速变酸,且生长缓慢,故传代后 48 小时内不应扰动;(3)普通TC处理的培养瓶或皿不能使细胞很好的贴壁,培养难度较高,需使用 Corning cellbind 细胞培养瓶(货号是 3289),或者使用多聚-L-赖氨酸溶液(货号 PB180523)包被过的培养皿; 4)在细胞运输途中,多数细胞会从培养瓶底分离,大片悬浮在培养基中,按照收货注意事项处理即可恢复正常。

保藏机构 ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按 12 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1.
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm
离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3.
将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
AP 标记的抗抗体10μL  环氧基磁珠2mL

HRP 标记的抗抗体10μL   A 溶液 ,10mg/mL1mL

显影定影套装1  滑膜细胞生长因子5mL

显影粉1  红细胞裂解液 B ( 流式细胞分析用 ) 100mL

定影粉1  红细胞裂解液 A ( 核酸纯化 ) 100mL
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa检测试剂盒

大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)elisa检测试剂盒

大鼠骨特性碱性磷酸酶C端肽elisa检测试剂盒免费代测

大鼠骨桥素(OPN)elisa检测试剂盒

大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)elisa检测试剂盒
LNCaP clone FGC (
前列腺癌细胞)大鼠11β羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)elisa分析检测试剂盒

大鼠11β羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)elisa检测试剂盒

大鼠12羟二十烷四烯酸(12-HETE)elisa分析检测试剂盒

大鼠12羟二十烷四烯酸(12-HETE)elisa检测试剂盒

大鼠12羟二十烷四烯酸(12-HETE)elisa检测试剂盒免费代测
实验报告:
产品仅用于科研一、分离与培养:
1
、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
2
、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3
、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5
、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1
、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5
PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6
、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。


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