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当前位置:首页产品中心分子生物学试剂探针标记及检测20微升细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)

细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)
产品简介:

细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)公司正*的各种产品组织氧化型甘肽(GSSG)浓度高效液相色谱定量检测试剂盒
体液氧化型甘肽(GSSG)浓度高效液相色谱定量检测试剂盒
植物氧化型甘肽(GSSG)浓度高效液相色谱定量检测试剂盒
细胞甘肽过氧化物酶(GSH PX)活性比色法定量检测试剂盒
血液甘肽过氧化物酶(GSH PX)活性比色法定量检测试剂盒

产品型号:20微升

更新时间:2022-04-22

厂商性质:经销商

访问量:311

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产品介绍

产品详细介绍:

本品是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。用于细胞内钙离子检测时,Fluo-3 AM的常用浓度为0.5-5μM。通常用含有0.5-5μMFluo-3 AM适当溶液和细胞一起在20-37℃孵育15-60分钟进行荧光探针装载,随后适当洗涤,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-3 AM在细胞内*转变成Fluo-3。本Fluo-3 AM (钙离子荧光探针) 是配制于无水DMSO中的储存液,浓度为5mM

分子式:C51H50Cl2N2O23

分子量:1129.85

Fluo-3Fura-2相比,其优点是:一方面可以被氩离子激光(argon-ion   laser)488nm激发光激发,便于检测;另一方面,Fluo-3和钙离子结合后荧光变化更强,即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏;同时,Fluo-3和钙离子的结合能力较弱,这样可以比Fura-2检测到细胞内更高浓度的钙离子水平;此外,对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确,减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。

注意事项:

1. Fluo-3 AM4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

储存条件:-20℃,有效期6个月。

下列是产品的订购信息!产品仅用于科研

中文名称

英文名称

产品规格

货号

细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3   AM)

Intracellular   calcium fluorescence probe

20微升

GOY-F10142

 

DNA提取流程图:
QQ截图20220414142532.png
实验步骤
(1)
实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65
水浴3-10 min,期间混匀2-3
(4)
加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4
离心20min
(8)
弃上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V体积的无水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
离心20 min
(12)
弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC处理水溶解
(14)
用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(
在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
兔血小板活化因子(rabbit PAF)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  5-Formyl-2-furylboronic acid  27329-70-0  中文名:  分子式:C5H5BO4  度:98.0%  关键词: 

兔血小板活化因子(rabbit PAF)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名:  分子式:C7H9N3O3  度:98.0%  关键词: 

兔血小板活化因子   英文名称:   Rabbit Platelet Activating Factor   规格:   48T/96T   英文缩写:   PAF  4-Hydroxysapriparaquinone  中文名:  分子式:C20H26O4  度:%

兔血纤蛋白原elisa试剂盒   兔血纤蛋白原试剂盒   规格型号:96T/48T   兔血纤蛋白原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔血纤蛋白原试剂盒、兔血纤蛋白原elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。  7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  22252-43-3  中文名:  分子式:C8H10N2O3S 

兔血纤蛋白原(Fbg)ELISAKit                 4-Aminobutyric acid  中文名:4-氨基丁酸  分子式:C4H9NO2
甲基反亚油酸甲酯(分析标准品)  Methyl linolelaidate  质量规格:分析标准品 ELISAKitITGαM/CD11b人整合素αM型规格:48T/96T

肉豆蔻酸甲酯(分析标准品,99.5%(GC))  Methyl myristate  质量规格:分析标准品,99.5%(GC) 小鼠亮酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒 ,英文名: LRG1 ELISA Kit

棕榈酸甲酯(分析标准品,99.0%(GC))  Methyl palmitate  质量规格:分析标准品,99.0%(GC) 人不对称二甲基精(ADMA)ELISA检测试剂盒Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISAKit 96T/48T

亚麻酸甲酯(标准品)  Methyl linolenate  质量规格:分析标准品 大鼠血小板衍生生长因子B(PDGF-B)试剂盒 Rat platelet-derived growth factor-B,PDGF-B ELISA Kit

十一酸甲酯(标准品)  Methyl undecanoate  质量规格:分析标准品 英文名称RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)规格:96T/48T

十九酸甲酯(标准品)  Methyl nonadecanoate  质量规格:分析标准品 钙离子膜通道钙交换体(NCX/内质网)功能荧光检测试剂盒20

丙二酸(标准品)   Malonate  质量规格:分析标准品 ELISAKitIegrinαⅤβ3人整合素αⅤβ3规格:48T/96T

D-异抗坏血酸(标准品)  D-(−)-Isoascorbic acid  质量规格:分析标准品 小鼠连环蛋白β1(CTNNβ1)ELISA试剂盒 ,英文名: CTNNβ1 ELISA Kit

亚油酸(分析标准品,99.0%(GC))  Linoleic acid  质量规格:分析标准品,99.0%(GC) 人补体片断5b(C5b)ELISA检测试剂盒HumanComplemefragme5b,C5bELISAKit 96T/48T

隐色结晶紫(标准品)  Leucocrystal Violet  质量规格:分析标准品 大鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)试剂盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit
细胞内钙离子荧光探针(Fluo-3 AM)组织C-KIT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞C-KIT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织BTK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞BTK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织BMK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C
操作步骤:
1.
匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
b.
单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
c
.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2
.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3
.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8
10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
7.
把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8
10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。


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