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产品型号：200μL
更新时间：2025-06-13
厂商性质：经销商
访问量：220
服务热线021-39596320
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DNA提取流程图：
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针 Fluo-3, AM | Fluo-3, AM | 200μL | GOY-F10178 |
产品详细介绍：
Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士发明的钙离子指示剂Fluo 系列之一，目前，Fluo-3 和Fluo-4 已成熟商品化。然而，Fluo-2 在细胞内比Fluo-4 要更明亮，主要可能是由于大部分细胞对FLuo-2 的加载能力要高于FLuo-4。 Fluo-3 成像涉及到钙离子信号通路的多个方面，Fluo-3 经常应用在流式细胞术上，如螯合剂光活化、第二信使、神经递质以及细胞水平的药理筛选。Fluo-3 在这些应用里之所以能大量运用主要是由于其几个重要特性：Fluo-3 可以被氩离子激光器488nm 激发，并在与Ca2+结合后，发射荧光很明亮的荧光信号。Fluo-4 是Fluo-3 以两个氟原子取代氯原子的类似物，这一微小的结构变化使得Fluo-4探针在488nm 激发光下的荧光信号得到增强，信号稳定持续，可以应用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、微孔板读数仪。 Fluo-2、Fluo-3 和Fluo-4 在与Ca2+结合后荧光增强，与紫外激发的探针fura-2 和indo-1 不同，不会发生光谱漂移。荧光光密度在与Ca2+结合后，增强至少100 倍。 储存：-20℃，避光，有效期12个月。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔钩端螺旋体IgGelisa试剂盒 兔钩端螺旋体IgG试剂盒 规格型号：96T/48T 兔钩端螺旋体IgG试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔钩端螺旋体IgG试剂盒、兔钩端螺旋体IgG elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名： 分子式：C10H16N2O6S3 度：98.0%
兔钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISAKit 6-Benzyloxyindole 15903-94-3 中文名：6-苄氧基吲哚 分子式：C15H13NO
兔钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 154127-42-1 中文名： 分子式：C10H16N2O6S3
兔睾(rabbit TESTO) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde 151103-08-1 中文名： 分子式：C8H6F2O3 度：98.0% 关键词：
兔干细胞因子(rabbit SCF) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 4-Chlorotestosterone acetate 855-19-6 中文名：醋酸氯 分子式：C21H29ClO3 度：98.0% 关键词：
十二烷基硫酸锂 Lithium Dodecyl Sulfate 质量规格：>98%,分子生物学级 MousesubstancePreceptor,SP-RELISA试剂盒小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒规格：96T/48T
硫代甜菜碱 8 Sulfobetaine 8 质量规格：>98%,sigma分装 小鼠颗粒酶B(GZMB)ELISA试剂盒 ，英文名： GZMB ELISA Kit
硫代甜菜碱 10 Sulfobetaine 10 质量规格：>98%,BR 人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)ELISA检测试剂盒Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 96T/48T
硫代甜菜碱 12 Sulfobetaine 12,SDDAB 质量规格：>98%,BR 大鼠血清素(5-羟色胺)-N-乙酰基转移酶(AANAT)试剂盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit
恩他卡朋;COMT抑制剂 Entacapone 质量规格：>99%,BR 英文名称RatLBPELISAKit大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)规格：96T/48T
曲拉通X-114 Triton X-114 质量规格：BC 高多糖多酚植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20
曲拉通X-405 Triton X-405 质量规格：70% in H2O ELISAKitFree-T3人游离三甲状腺原规格：48T/96T
CHAPS;3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸 CHAPS 质量规格：>98.5% 小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒 ，英文名： Gzms-A ELISA Kit
CHAPSO；3-[(3-胆氨丙基)二甲基氨基]-2-羟基-1-丙磺酸 CHAPSO 质量规格：>99%,分子生物学级； 大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA检测试剂盒RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T
二硫赤藓(DTE)；1,4-二硫代赤藓 1,4-Dithioerythritol 质量规格：>99%,进分sigma 人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)试剂盒 Human Protein Kinase C beta II,PKC-bII ELISA Kit
Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针 Fluo-3, AM组织C-TAK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
细胞C-TAK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
组织B-RAF激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
细胞B-RAF激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
组织AMPK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
