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当前位置:首页产品中心分子生物学试剂探针标记及检测1mgFluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)

Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)
产品简介:

Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)公司正*的各种产品细胞半胱-9(CASPASE-9)活性荧光定量检测试剂盒
组织半胱-9(CASPASE-9)活性荧光定量检测试剂盒
细胞半胱-10(CASPASE-10)活性比色法定量检测试剂盒
组织半胱-10(CASPASE-10)活性比色法定量检测试剂盒
细胞半胱-10(CASPASE-10)活性荧光定量检测试剂盒

产品型号:1mg

更新时间:2025-06-13

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Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)

Fluo-2, AM

1mg

GOY-F10179

产品详细介绍:

Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士发明的钙离子指示剂Fluo 系列之一,目前,Fluo-3 Fluo-4 已成熟商品化。然而,Fluo-2 在细胞内比Fluo-4 要更明亮,主要可能是由于大部分细胞对FLuo-2 的加载能力要高于FLuo-4

Fluo-3 成像涉及到钙离子信号通路的多个方面,Fluo-3 经常应用在流式细胞术上,如螯合剂光活化、第二信使、神经递质以及细胞水平的药理筛选。Fluo-3 在这些应用里之所以能大量运用主要是由于其几个重要特性:Fluo-3 可以被氩离子激光器488nm 激发,并在与Ca2+结合后,发射荧光很明亮的荧光信号。Fluo-4 Fluo-3 以两个氟原子取代氯原子的类似物,这一微小的结构变化使得Fluo-4探针在488nm 激发光下的荧光信号得到增强,信号稳定持续,可以应用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、微孔板读数仪。

Fluo-2Fluo-3 Fluo-4 在与Ca2+结合后荧光增强,与紫外激发的探针fura-2 indo-1 不同,不会发生光谱漂移。荧光光密度在与Ca2+结合后,增强至少100 倍。

储存:-20℃,避光,有效期12个月。

 

操作步骤:
1.
匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
b.
单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
c
.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2
.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3
.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8
10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
7.
把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8
10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔干扰素-β(rabbit IFN-β)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  5-Benzyl D-glutamate  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4  度:98.0%

兔干扰素-r(rabbit IFN-r)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装     5-Benzyl D-glutamate  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4 

兔干扰素-a(rabbit IFN-a)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  5-Benzyl L-glutamate  1676-73-9  中文名:L-5-苄酯  分子式:C12H15NO4 

兔肝细胞生长因子(rabbit HGF)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-74-6  中文名:  分子式:C18H27N3O4 

兔分泌型球蛋白Aelisa试剂盒   兔分泌型球蛋白A试剂盒   规格型号:96T/48T   兔分泌型球蛋白A试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔分泌型球蛋白A试剂盒、兔分泌型球蛋白A elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3
N-
硝基-L-精甲酯  N'-Nitro-L-arginine-methyl ester   质量规格:>98% Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit大鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒规格:96T/48T

N-苯甲酰-L-酪乙酯(BTEE)  N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  质量规格:>98% GPDGP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

AEBSF丝抑制剂  AEBSF HCl  质量规格:>98%,BR MouseSubstanceP,SPELISA试剂盒小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

AEBSF(进分)  AEBSF HCl  质量规格:>97%,进分TCI A2215 小鼠颗粒酶A(GZMA)ELISA试剂盒 ,英文名: GZMA ELISA Kit

盐酸贝他定(进口)  Bestatin HCl  质量规格:≥98%,美国进口 人芳香烃受体(AhR)ELISA检测试剂盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T

邻菲啰啉盐酸盐,一水  1,10-Phenanthroline  monohydrate  质量规格:>99% 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)试剂盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit

膦酰二肽钠  Phosphoramidon di salt  质量规格:0.99 英文名称RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)规格:96T/48T

癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷  Decyl β-D-glucopyranoside   质量规格:>98%,BR 高多糖多酚植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20

德罗特韦(GSK-1349572,DTG)  Dolutegravir,GSK1349572  质量规格:>98%,BR ELISAKitfPSA人游离前列腺特异性抗原规格:48T/96T

十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖  Dodecyl glucopyranoside  质量规格:>99%,BR 小鼠抗内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒 ,英文名: EMAb ELISA Kit
Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR
分析-钙离子指示探针)细胞AMPK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

组织Src激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

细胞Src激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C

实验步骤
(1)
实验开始前将RNA提取液于65水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65
水浴3-10 min,期间混匀2-3
(4)
加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V体积10M LiCl溶液,4放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4
离心20min
(8)
弃上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V体积的无水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
离心20 min
(12)
弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC处理水溶解
(14)
用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(
在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)


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