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3004901493
产品型号:1mg
更新时间:2025-06-13
厂商性质:经销商
访问量:487
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DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针) | Fluo-2, AM | 1mg | GOY-F10179 |
产品详细介绍:
Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士发明的钙离子指示剂Fluo 系列之一,目前,Fluo-3 和Fluo-4 已成熟商品化。然而,Fluo-2 在细胞内比Fluo-4 要更明亮,主要可能是由于大部分细胞对FLuo-2 的加载能力要高于FLuo-4。 Fluo-3 成像涉及到钙离子信号通路的多个方面,Fluo-3 经常应用在流式细胞术上,如螯合剂光活化、第二信使、神经递质以及细胞水平的药理筛选。Fluo-3 在这些应用里之所以能大量运用主要是由于其几个重要特性:Fluo-3 可以被氩离子激光器488nm 激发,并在与Ca2+结合后,发射荧光很明亮的荧光信号。Fluo-4 是Fluo-3 以两个氟原子取代氯原子的类似物,这一微小的结构变化使得Fluo-4探针在488nm 激发光下的荧光信号得到增强,信号稳定持续,可以应用于共聚焦显微镜、流式细胞仪、微孔板读数仪。 Fluo-2、Fluo-3 和Fluo-4 在与Ca2+结合后荧光增强,与紫外激发的探针fura-2 和indo-1 不同,不会发生光谱漂移。荧光光密度在与Ca2+结合后,增强至少100 倍。 储存:-20℃,避光,有效期12个月。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔干扰素-β(rabbit IFN-β) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-Benzyl D-glutamate 中文名:D-谷5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0%
兔干扰素-r(rabbit IFN-r) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-Benzyl D-glutamate 中文名:D-谷5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4
兔干扰素-a(rabbit IFN-a) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-Benzyl L-glutamate 1676-73-9 中文名:L-谷5-苄酯 分子式:C12H15NO4
兔肝细胞生长因子(rabbit HGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 3543-74-6 中文名: 分子式:C18H27N3O4
兔分泌型球蛋白Aelisa试剂盒 兔分泌型球蛋白A试剂盒 规格型号:96T/48T 兔分泌型球蛋白A试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔分泌型球蛋白A试剂盒、兔分泌型球蛋白A elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名: 分子式:C10H16N2O6S3
N-硝基-L-精甲酯 N'-Nitro-L-arginine-methyl ester 质量规格:>98% Ratphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit大鼠0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-苯甲酰-L-酪乙酯(BTEE) N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester 质量规格:>98% GPDGP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
AEBSF丝抑制剂 AEBSF HCl 质量规格:>98%,BR MouseSubstanceP,SPELISA试剂盒小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
AEBSF(进分) AEBSF HCl 质量规格:>97%,进分TCI A2215 小鼠颗粒酶A(GZMA)ELISA试剂盒 ,英文名: GZMA ELISA Kit
盐酸贝他定(进口) Bestatin HCl 质量规格:≥98%,美国进口 人芳香烃受体(AhR)ELISA检测试剂盒Humanarylhydrocarboeceptor,AhRELISAKit 96T/48T
邻菲啰啉盐酸盐,一水 1,10-Phenanthroline monohydrate 质量规格:>99% 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)试剂盒 Rat Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
膦酰二肽钠 Phosphoramidon di salt 质量规格:0.99 英文名称RatLPSELISAKit大鼠脂多糖(LPS)规格:96T/48T
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 Decyl β-D-glucopyranoside 质量规格:>98%,BR 高多糖多酚植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20
德罗特韦(GSK-1349572,DTG) Dolutegravir,GSK1349572 质量规格:>98%,BR ELISAKitfPSA人游离前列腺特异性抗原规格:48T/96T
十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖 Dodecyl glucopyranoside 质量规格:>99%,BR 小鼠抗内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒 ,英文名: EMAb ELISA Kit
Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-钙离子指示探针)细胞AMPK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞PKC激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织Src激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞Src激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)