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3004901493
产品型号:100μL
更新时间:2025-06-13
厂商性质:经销商
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021-39596320
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DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
线粒体橙色荧光探针 | MitoOrange | 100μL | GOY-F10182 |
产品详细介绍:
具有细胞膜渗透性的MitoOrange(分子量427.4)探针包含一个温和的巯基反应性氯甲基基团,可用于标记线粒体,并在固定之后保留在线粒体内。标记线粒体,细胞可以与MitoOrange 探针简单孵育,探针通过被动扩散传过质膜,并在有活性的线粒体内富集。一旦线粒体被标记,细胞再用醛基类固定剂固定之后,就可以进一步做下游实验的深入处理。这些MitoOrange 染料可以解决一些致病性细胞上研究所面临的困难,因为标记线粒体可以在细胞被固定之前开展。 虽然传统的荧光染料,如四甲基罗丹明和罗丹明123,很容易识别功能性线粒体,但是这些染料一旦在线粒体去极化时也很容易被洗涤出线粒体。这些缺点限制了常规染色实验中所用的醛类固定剂,以及一些实验用的处理药品的选择。而MitoView 染料可以很好的解决这一问题。 浓度:0.5mM in DMSO 储存:-20℃,避光,有效期6个月 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔补体蛋白3elisa试剂盒 兔补体蛋白3试剂盒 规格型号:96T/48T 兔补体蛋白3试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔补体蛋白3试剂盒、兔补体蛋白3 elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 114772-54-2 中文名: 分子式:C14H10BrN 度:98.0% 关键词:
兔补体蛋白3(C3)ELISAKit 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2 度:98.0%
兔半胱酸蛋白酶抑制剂elisa试剂盒 兔半胱酸蛋白酶抑制剂试剂盒 规格型号:96T/48T 兔半胱酸蛋白酶抑制剂试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔半胱酸蛋白酶抑制剂试剂盒、兔半胱酸蛋白酶抑制剂elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 114772-54-2 中文名: 分子式:C14H10BrN
兔半胱酸蛋白酶抑制剂C 英文名称: Rabbit Cystatin C 规格: 48T/96T 英文缩写: CSTC 4-Oxododecanedioic acid 中文名: 分子式:C12H20O5
兔半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 183288-46-2 中文名: 分子式:C13H15N3O2
羟基磷灰石 Hydroxyapatite 质量规格:>99%,粒径20nm RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羟丙基甲基纤维素(粘度11250-21000mPas) Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M 质量规格:粘度11250-21000mPas GSK-3ALPHA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
羟丙基甲基纤维素 Hydroxypropylmethylcellulose 质量规格:粘度55 - 60 mPa.s MouseTestoterone,TELISA试剂盒小鼠睾同(T)ELISA试剂盒规格:96T/48T
羟丙基甲基纤维素(30000 mpa.s) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose 质量规格:30000 mpa.s,BR 小鼠抗增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA试剂盒 ,英文名: PCNA ELISA Kit
羟丙基甲基纤维素(4000mpas) HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose 质量规格:粘度K4m,4000 mpa.s 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA检测试剂盒Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 96T/48T
麦芽糖;淀粉糖 D-(+)-Maltose monohydrate 质量规格:>92%,一水物 大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit
ONX-0914 (PR-957) ONX0914;PR957 质量规格:>98%,immunoproteasome抑制剂 英文名称RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格:96T/48T
N-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺(MEGA9) N-Nonanoyl-N-methylglucamine 质量规格:>98%,BR 高多糖多酚植物组织叶绿体DNA高分离试剂盒10/20
甲基纤维素(100000mPa.s) Methyl cellulose 质量规格:粘度100000mPa.s ELISAKitFT4人游离甲状规格:48T/96T
甲基纤维素(4000 mPa.s) Methyl cellulose, middle viscosity 质量规格:4000mPa.s,BR 小鼠抗(AT)ELISA试剂盒 ,英文名: AT ELISA Kit
线粒体橙色荧光探针组织AURORA-B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞AURORA-B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织AURORA-A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞AURORA-A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
组织Akt/PKB激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C)
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)