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产品型号：10mg
更新时间：2025-06-13
厂商性质：经销商
访问量：301
服务热线021-39596320
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DNA提取流程图：
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
细胞质标记染料,长效示踪CDCFDA,SE | 5-(and-6)-Carboxy-2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester | 10mg | GOY-F10183 |
产品详细介绍：
活细胞荧光示踪探针CDCFDA, SE已被广泛证实，用CDCFDA 活细胞绿色荧光探针标记细胞能有效确定总细胞的数量和一个样本中存在多少活细胞。流式细胞术结合荧光染色法是分析非均质细胞种群的有力工具。 FDA 和它的衍生物无荧光分子进入细胞后被胞内无特异性的酯酶所水解产生荧光。这些荧光产物只能积聚在具有完整细胞膜的细胞中。因此，死细胞无完整细胞膜不能被染色。FDA 具备精确地膜转运动力学和胞内水解作用或者类似物（CDCFDA）相关的细胞功能，因此可以通过荧光显微镜或者流式细胞仪来检测FDA 标记的细胞。过FDA 荧光标记的细胞在细胞系或者菌株中存在变化，可能是由于不同胞内酯酶的活性所造成的。活细胞荧光示踪探针CDCFDA, 琥珀酰亚胺酯是一个胺化FDA 衍生物，可以用来制备各种FDA偶联物。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物*分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
兔白细胞介素35elisa试剂盒 兔白细胞介素35试剂盒 规格型号：96T/48T 兔白细胞介素35试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔白细胞介素35试剂盒、兔白细胞介素35 elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 4-Biphenylcarboxylic acid 中文名：4-苯甲酸 分子式：C13H10O2 度：98.0%
兔白细胞介素-35（IL-35）ELISA试剂盒 4β-Hydroxywithanolide E 中文名：4β-羟基醉茄内酯E 分子式：C28H38O8 度：98.0%
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兔白细胞介素1elisa试剂盒 兔白细胞介素1试剂盒 规格型号：96T/48T 兔白细胞介素1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔白细胞介素1试剂盒、兔白细胞介素1elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 4-Biphenylcarboxylic acid 中文名：4-苯甲酸 分子式：C13H10O2
兔白细胞介素15elisa试剂盒 兔白细胞介素15试剂盒 规格型号：96T/48T 兔白细胞介素15试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔白细胞介素15试剂盒、兔白细胞介素15elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 4-Biphenylcarboxylic acid 92-92-2 中文名：4-苯甲酸 分子式：C13H10O2 度：98.0%
D-核糖(标准品) D-(-)-Ribose 质量规格：>99%,标准品 大鼠乙酰(Ach)ELISA检测试剂盒Ratacetylcholine,ACHELISAKit 96T/48T
D-核糖 D-(-)-Ribose 质量规格：>98%,BR 人蛋白C(PC)试剂盒 Human Protein C ELISA Kit
二硫苏糖(DTT) DL-Dithiothreitol 质量规格：>99%,分子生物学级 RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit大鼠0酸肌3激酶(PI3K)ELISA试剂盒规格：96T/48T
D(+)-松二糖 D(+)-Turanose 质量规格：>98%,BR GSK-3ALPHA蛋白共沉淀分析试剂盒5
D-果糖-1,6-二三钠盐 D-Fructose 1,6-bisphosphate salt 质量规格：>98%,BR Mousethioredoxieductase,xRELISA试剂盒小鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
海带多糖；昆布糖 (来自褐藻类) Laminarin from Laminaria digitata 质量规格：BR，日本进口分装 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒 ，英文名： PA-IgG/M/A ELISA Kit
(1:250)，粉 Pancreatin 质量规格：酶活1:250,BR 大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA检测试剂盒RatThromboxaneB2,TXB2ELISAKit 96T/48T
木瓜蛋白酶(800u/mg) Papain 质量规格：800u/mg 人蛋白ATP1B4(ATP1B4)试剂盒 Human ATP1B4 ELISA Kit
木瓜蛋白酶(2000u/mg) Papain 质量规格：2000u/mg;200万u/g Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
(1:2500) Pancreatin 质量规格：酶活1:2500,BR GSK-3BETA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
细胞质标记染料,长效示踪CDCFDA,SE细胞Akt/PKB激酶总活性定量检测试剂盒（A/B/C）
组织Akt3/PKBγ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
细胞Akt3/PKBγ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
组织Akt2/PKBβ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
细胞Akt2/PKBβ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
