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3004901493
产品型号:10mL
更新时间:2022-04-22
厂商性质:经销商
访问量:349
021-39596320
DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
石蜡油,PCR级 | Paraffin,PCR Grade | 10mL | GOY-F10261 |
产品详细介绍:
本产品是PCR级石蜡油试剂,专门用于PCR扩增、WGA扩增等实验时添加到反应体系中,封闭反应成分,防止溶液的挥发。 储存条件:常温运输及保存,有效期一年。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人粘膜相关上皮趋化因子elisa试剂盒 人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒 规格型号:96T/48T 人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人粘膜相关上皮趋化因子试剂盒、人粘膜相关上皮趋化因子elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide 中文名: 分子式:C11H10ClN3OS 度:98.0%
人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒 2-Aminophenyl phenyl sulfide 中文名:2-氨基二苯硫醚 分子式:C12H11NS
人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISAKit 2-Aminofluorene 153-78-6 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N 度:99.0% 关键词:
人早老素2elisa试剂盒 人早老素2试剂盒 规格型号:96T/48T 人早老素2试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:人早老素2试剂盒、人早老素2 elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide 中文名: 分子式:C11H10ClN3OS
人游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISAKit 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN 度:98.0%
赤藓红;赤藓红B钠盐 Erythrosin B salt 质量规格:BS Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISA试剂盒菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
达拉菲尼,达帕菲尼 Dabrafenib,GSK2118436A 质量规格:>98%,BRAFV600特异性抑制剂 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 试剂盒
乙酰柠檬酸三丁酯 Acetyl tributyl 质量规格:>97% Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒
乙酰柠檬酸三乙酯 Triethyl acetyl 质量规格:>99% Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重组激活基因1(RAG-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
海藻酸 Alginic acid 质量规格:CP Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA试剂盒人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
C棕榈酸酯/L-抗坏血酸棕榈酸酯 6-O-Palmitoyl-L-ascorbic Acid 质量规格:0.99 植物赖(lysine)含量化学比色法定量检测试剂盒20
阿斯巴甜 Aspartame 质量规格:>98%,BR HumanVitaminB6,VB6ELISAKit人B6(VB6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
克拉维酸钾 Potassium clavulanate 质量规格:标准品 小鼠甲腺原酸脱酶Ⅲ(DIO3)ELISA试剂盒 ,英文名: DIO3 ELISA Kit
刺槐素 ROBININ 质量规格:>98%,标准品 人弹性蛋白(Elastin)ELISA检测试剂盒HumanElastinELISAKit 96T/48T
Amfebutamone 质量规格:>98.0%,进口 大鼠凝血酶受体()试剂盒 Rat thrombin receptor, ELISA Kit
石蜡油,PCR级组织3-羟-3-甲戊二酰(HMG-COA)还原酶活性直接比色法
细胞3-羟-3-甲戊二酰(HMG-COA)还原酶活性直接比色法
血液乙醛脱氢酶4活性比色法定量检测试剂盒
组织乙醛脱氢酶4活性比色法定量检测试剂盒
细胞乙醛脱氢酶4活性比色法定量检测试剂盒
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)