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3004901493
产品型号:5mL
更新时间:2022-04-22
厂商性质:经销商
访问量:374
021-39596320
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DNA提取流程图:
下列是产品的订购信息!产品仅用于科研
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 货号 |
PCR级甲酰胺 | Formamide,PCR Grade | 5mL | GOY-F10264 |
产品详细介绍:
本产品为PCR级的甲酰胺,其可以促进某些引物、模板退火,降低带有二级结构的DNA的变性温度,是一种常用的PCR增强剂。 储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。 |
操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物*分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
人血小板反应蛋白2(TSP-2)酶联吸附测定试剂盒 Human TSP-2 (Thrombospondin-2) ELISA Kit 2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 中文名: 分子式:C5H6N2OS
人血小板反应蛋白1(TSP-1)酶联吸附测定试剂盒 Human TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit 2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 中文名: 分子式:C5H6N2OS 度:98.0%
人血栓调节蛋白(TM)酶联吸附测定试剂盒 Human TM (Thrombomodulin) ELISA Kit 3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 148901-68-2 中文名: 分子式:C21H16FNO
人血栓调节蛋白 英文名称: thrombomodulin 规格: 48T/96T 英文缩写: TM Rivaroxaban 366789-02-8 中文名: 分子式:C19H18ClN3O5S
人血浆抗凝蛋白S(PS)ELISAKit 2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone 中文名: 分子式:C5H8O4 度:98.0%
马西替坦;ACT064992 Macitentan 质量规格:>99%,内皮素(ET)受体拮抗剂 phytohaemagglinin,PHAELISA试剂盒植物血凝素(PHA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组蛋白去乙酰化酶抑制剂(M 344) M344 质量规格:>98%,HDAC抑制剂 小鼠甲基CpG结合蛋白2(MECP2)ELISA试剂盒 ,英文名: MECP2 ELISA Kit
2-硝基咪唑 2-Nitroimidazole 质量规格:>98%, 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA检测试剂盒Humaibonuclease,RNASEELISAKit 96T/48T
4-(三氟甲基)-1H-咪唑 4-(Trifluoromethyl)-1H-imidazole 质量规格:>98% 大鼠心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)试剂盒 Rat hea fatty acid binding protein,h-FABP ELISA Kit
2-甲基-4-三氟甲基咪唑 2-Methyl-4-trifluoromethylimidazole 质量规格:>97% 英文名称RatniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠合成酶(NOS)规格:96T/48T
2-氨基咪唑硫酸盐 2-Aminoimidazole hemisulfate 质量规格:>98% 寡核苷酸探针非同位素HRP-DAB显色法DNA斑点杂交*试剂盒5
奥当卡替(MK-0822) Odanacatib;MK0822 质量规格:>98%,cathepsin K抑制剂 ELISAKitIAA人胰岛素自身抗体规格:48T/96T
4-硝基儿茶酚 4-NITROCATECHOL 质量规格:HPLC>98.0% ,标准品 小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒 ,英文名: HK1 ELISA Kit
4-硝基儿茶酚 4-NITROCATECHOL 质量规格:>98.0% ,进口分装 人喋呤(MTX)ELISA检测试剂盒Humanmethoexate,MTXELISAKit 96T/48T
曲格列酮 Troglitazone(CS-045) 质量规格:>98%,BR 大鼠心肌营养素1(CT-1)试剂盒 Rat cardioophln 1,CT-1 ELISA Kit
PCR级甲酰胺组织乙醛脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒
细胞乙醛脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒
血液乙脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒
组织乙脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒
细胞乙脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒
实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊(25:24:1)抽提两次,:异戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)