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总抗氧化能力(ABTS法)可见分光光度法
产品简介:

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产品型号:

更新时间:2022-03-14

厂商性质:经销商

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产品介绍

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:总抗氧化能力(ABTS法)可见分光光度法测试盒
规格50/48
测试方法可见分光光度法
货号:GOY-01S6441
分类:氧化与抗氧化系列
商品介绍:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

测定原理:

ABTS法是使用*泛的间接检测方法,可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTS经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介质中,在734nm处有最大吸收。被测物质加入ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能与ABTS+发生反应而使反应体系褪色。在734nm检测吸光度的变化,并以Trolox作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。

自备实验用品:

恒温水浴锅、低温离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4保存;
测定步骤
1
分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2
将试剂一、二、三37(哺乳动物)25(其它物种)预热10分钟。
3
加样表:

图1.jpg

样本的前处理
FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定。
胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)1510的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4200g离心5min,弃沉淀,取上清在48000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤提取粗酶液。
酵母蛋白酶抑制剂1mL  PAGE 胶长加样枪头1

His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL  Paclitaxel(TAXOL)(  )100μL

组织培养基蛋白酶抑制剂1mL  OrigamiB(DE3) 感受态细胞10×100μL

α2巨球蛋白25Inh.U  Origami(DE3) 感受态细胞0.1mL×10

AEBSF 溶液,10mg/mL5mL  Origami B(DE3)plysS 感受态细胞 0.1mL×10

miRNA 电泳分子量标准30   鸟类种属鉴定 PCR Mix100

微量 RNA 助沉剂0.1mL  尼龙膜,13×20cm1

微量 DNA 助沉剂0.1mL  内皮细胞生长因子5mL

DNA Acryl 助沉剂1mL  内毒素清除专用亲和介质5mL

彩色 Acryl 助沉剂1g  内毒素清除专用亲和介质50mL
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总抗氧化能力(ABTS法)可见分光光度法测试盒填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5  接头 DNA(Sal I-Sma I)5nmol

DNA 5’末端标记试剂盒10   接头 DNA(pSma I)5nmol

dNTP 溶液 ( 标记专用 )0.5mL  接头 DNA(Hind -Sma I)5nmol

标记 dUTP 溶液50μL  接头 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol

Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL  接头 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
FBP活性计算:
1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(W ×V÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反总:反应体系总体积,1×10-3 LεNADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.1 mLV样总:加入提取液体积,1mLT:反应时间,5 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g


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