天冬氨酸转氨酶(AST)真核蛋白人公司正在出售的产品：磷酸化gp130抗体 英文名称：phospho-gp130 (Ser782) 0.1ml糖脂转移蛋白结构域2抗体 英文名称：GLTPD2 0.2ml胞浆区相关蛋白GIPC2抗体 英文名称：GIPC-2 0.2ml

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产品属性：

英文名称：Eukaryotic Aspartate Aminotransferase (AST)

cCAT; AAT; ASAT; SGOT; GOT1; Cysteine transaminase, cytoplasmic; Transaminase A; Aspartate Transaminase 1,Cytoplasmic; Glutamic-Oxaloacetic Transaminase 1,Soluble

型号：GOY-01D3031

酶与激酶

肿瘤免疫

感染免疫

肝胆病学

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：真核表达

宿主Yeast

内毒素水平：<1.0EU per 1ug (determined by the LAL method)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：47.5kDa

实际分子量：48kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ala2~Gln413 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液，（pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：6.6

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。

交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

公司正在出售的产品：

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竹红菌乙素;Hypocrellin B 规格： 20mg 订购|咨询

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 QGY-7701(人肝细胞)5×106cells/瓶×2

紫茎女贞苷B;Ligupurpurosi 规格： 10mg 订购|咨询

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