ATCC细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以zui大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建...

转化细胞医疗技术的临床应用开始于1968年，当年科学家们完成了世界上*例骨髓移植术，其有效成分是造血干细胞。此后，造血干细胞移植被大量用于治疗某些恶性血液病和肿瘤，而造血干细胞的来源逐渐从骨髓替换为外周血，进而是脐带血。1988年来自法国的研究者Gluckman教授在上成功采用脐血造血干细胞移植，救治了一名贫血患儿，这项研究标志着脐带血造血干细胞移植时代的开启。如今每年大约会进行6万例骨髓移植手术，其中使用自体和同种异体造血干细胞完成骨髓移植术的患者人数大约分别为3.5万和2...

转化细胞分裂是指细胞分裂为两个相同副本的过程。普通人的一生中要经历无数次的这一过程。为了生成两个*相同的副本，细胞必须地分离它们的染色体，这一事件依赖于称之为动粒（kinetochore）的专门结构将染色体双向附着到纺锤体微管上。在细胞分裂的早期阶段，动粒结合纺锤体微管会发生许多的错误。正常的细胞能够有效地纠正这些错误，确保染色体正确分离。而癌细胞通常不会纠正这些错误，使得子细胞染色体数目异常，从而帮助这些癌细胞抵抗化疗。达特茅斯Geisel学院生物化学教授Compton也发...

实验方法原理体外培养转化细胞生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的，如随着分裂指数的不断提高，细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比，它是测定细胞周期的一个重要指标，也是不同实验研究选择细胞的重要依据。实验材料细胞试剂、试剂盒胰酶甲醇培养液冰醋酸Giemsa染液仪器、耗材CO2培养箱普通显微镜培养皿盖玻片吸管实验步骤一、消化细胞，将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中。二、CO2培养箱中培养48小时，使细胞长在盖片上。三、取出盖...

在许多后生动物的发育早期ATCC细胞即从体细胞谱系中分离出来，并终身维持生殖系细胞身份。现在，来自约翰霍普金斯大学的研究人员报告称，发现负责生成抑制性染色质标记H3K27me3的一种组蛋白甲基转移酶果蝇多梳家族蛋白Enhancerofzeste(E(z))，以一种非细胞自主方式维持了生殖细胞的身份。研究人员对成体果蝇睾丸进行了分析，成体睾丸中包含有有丝分裂后包囊细胞（cystcell）以及睾丸顶端的另外两种体细胞——中心细胞（hubcell）和与生殖干细胞（GermlineS...

以硅为基础，能将活转化细胞变为不会腐烂的材料，使其耐受高能探针的检测，在癌症、干细胞等生物学领域有着广阔的应用前景。将体外培养的组织细胞浸入硅溶液，进行**硬化。随后他们提高温度烧掉了其中的生物物质，结果得到了的细胞复制品。研究人员用电镜检测了细胞内部，发现这一技术很好的复制了微观细胞器，建立了几乎的硅复制品（从整体形状到纳米结构）。硅浆处理有助于人们进一步检测癌症发展和细胞生长。这一技术不需要繁琐的“固定”过程，能够很好的稳定生物材料，防止它们在电子束分析时崩溃.建立干细胞...

1、ATCC细胞在冰上预冷2支14-mlBDFalcon聚丙烯圆底离心管。1支用来转化样品，1支做pUC18对照。同时将NZY+broth培养基在42°C预热。2、冰上融化感受态细胞。融化时轻轻将细胞混匀并分装成100ul/管。3、每管中加入随试剂盒提供的4mlb-ME（巯基乙醇）。4、温和转动试管，将细胞在冰上放置10分钟，每2分钟温和转动一下。5、每管细胞加入0.1–50ng样品DNA（或2ml连接反应物）（参见DNA质量与体积说明。）用灭菌dH2O水按1:10稀释对照p...

转化细胞处于某一特定状态时，它会选择性阅读与该细胞相关的所有信息，同时要屏蔽其它不需要的信息。将体细胞诱导为多能干细胞（俗称的“细胞水平返老还童”）是探索这种机理的理想体系。成纤维细胞在导入诱导因子后，会启动一套奇妙的未知程序，将体细胞返老还童到受精后约3-5天的状态。过去10年来，*的科学家都在研究这一奇妙的过程，得到的成果极大地丰富了人类对细胞命运调控的认识。但目前对这一过程的了解主要以观察变化的现象为主，并没有从中抽象出具有普遍性逻辑或者规律。在该研究中，科研人员采用A...

预防是防止ATCC细胞培养过程中发生污染的办法。只有预防工作做在前，才能将发生污染的可能性降到zui小程度。一般预防可从以下几方面着手：1、添加抗生素2、从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要*，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在无菌试验阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。3、从操作者做起(1)进无菌室前要用肥皂洗手，按规定穿隔离衣。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。(2)操作者动作要轻，必须在火焰周围无菌区内打开瓶口，并将瓶口...

ATCC细胞诱导转移将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内细胞的运动方向，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。常用有普通transwell小室（用于迁移实验）和铺有基质的transwell小室（用于侵袭实验）。应用实例：1、迁移实验：迁移实验通常选择带有8.0µm...

干细胞因子中不含载体蛋白（CarrierProtein）或其他添加剂（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以zui少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底（此时能否见到白色沉淀均属正常现象）。1．离心：高速离心(10,000rpm)20-30秒，或低速离心(2,000rpm)5分钟。2．溶解（Reconstitution）：用去离子水或其它缓冲...

在胸腺中，ATCC细胞从前体细胞形成，后者不断被新到达的骨髓祖细胞取代。ELISA试剂盒Hans-ReimerRodewald及同事发现，这是“老"细胞与“新"细胞之间竞争的结果。在没有细胞竞争的情况下，当新骨髓祖细胞的流入在小鼠体内被阻断时，老细胞就会重新获得自我更新并zui终被改变的能力，导致“T-细胞急性淋巴细胞性白血病"(T-ALL)的发生，ELISA试剂盒与人类的这种白血病相似。研究表明，细胞运动依赖于伪足的边缘凸起、粘着和恢复来实现。可以看到细胞核在受到肌肉细胞组...