-
技术文章
elisa检测试剂盒的标准及使用参考
虽然elisa检测试剂盒方法优势重重,但只有真正的选对了ELISA试剂盒才能做出省时、省力的ELISA实验。那么在今天的文章内容中,上海谷研公司带您了解试剂盒的标准及使用参考介绍。一:定量标准①溶液配置体积按照入库数量配置,避免浪费;②零标准的OD值入库时控制在2.200-2.500;③标准曲线线性要求大于0.99;④标准曲线的拐点≤2;⑤IC50值介于中间标准品内;⑥B点结合率介于75%-90%之间。二:定量要求①入库分装用的试剂配制好后,避免直接使用原瓶试剂,特别是需要多...
+
-
技术文章
小鼠elisa检测试剂盒实验的几点问题
小鼠elisa检测试剂盒新的一年又开始了!又是新的一月,我公司当然也有新的东西要分享给大家,下面我们一起来看看盘点ELISA试剂盒实验的哪些事儿。在使用之前,要将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。1.双抗体夹心法2.双位点一步法3.间接法测抗体4.竞争法5.捕获法测IgM抗体6.应用亲和素和生物素普遍用作非放射性同位素的成键化验。在这种方法中,通常标准...
+
-
技术文章
小鼠elisa检测试剂盒实验之显色
小鼠elisa检测试剂盒实验中显色是ELISA中的zui后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显况适当缩短或延长反应时间,及时判断。OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即...
+
-
技术文章
大鼠elisa检测试剂盒检测重组蛋白的
大鼠elisa检测试剂盒采用RT-PCR扩增出大小409bp猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因(PRRSVNgene),将该基因克隆到表达载体pGEX-KG,构建重组表达载体pGEX-KG-N,转化表达菌株BL21(DM3)诱导表达,经SDS-PAGE和Westernblot分析表明,重组N蛋白获得了表达,融合蛋白相对分子质量为41000,并具有良好的免疫学活性。ELISA试剂盒置4℃前提保留12个月,试剂盒不乱性无显著改变。研制的ELISA试剂盒为PRRSV临床血清抗体检...
+
-
技术文章
小鼠elisa检测试剂盒手工测定的影响因素
小鼠elisa检测试剂盒法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,并具有操作简便、无放射性危害的优点,因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中,但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察,认为影响结果的因素有如下方面。1试剂盒(1)抗原、抗体活性对效价的影响:主要是试剂中抗体(或抗原)的效价降低或失活,结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高,对杂质的反应灵敏度也高,实验中空白对照OD值偏高或假阳性。(2)酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。2试验仪器(1)...
+
-
技术文章
转化细胞质量和可塑性
在转化细胞内葡萄糖的代谢对于胰岛素基因表达和胞外分泌的贺尔蒙来说是很关键的一环,但是有越来越多的证据显示,葡萄糖代谢途径同时对于β-细胞发育和维持成年人的β细胞质量非常重要。在小鼠β细胞中针对葡萄糖激酶剃除后不仅防止了葡萄糖所刺激的胰岛素分泌,而且也抑制了β细胞的增殖,并与细胞凋亡的增加有关联。在组织培养中,直接操纵胚胎胰脏的葡萄糖可用性实验则显示了转录调控因子神经元素3(Neurog3)和NEUROD对于α和β细胞的发育是很必要的存在。针对此主题,帕特尔等人的论文提到丙酮酸...
+
-
技术文章
转化细胞培养小技巧
转化细胞培养的路上,有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼泪,听小纳君说几句,希望下面这几点建议可以帮助你在细胞培养的路上,少一点污染,多一点快乐!细胞方面1.不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基。2.发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。3.不同细胞生长周期不同。有...
+
-
技术文章
ATCC细胞新的研究方向和思路
ATCC细胞是一群具有分化多能性、位于心脏外层的细胞,研究发现其可分化成纤维细胞、血管平滑肌细胞甚至心肌细胞,但其转化成脂肪细胞的能力鲜有报道。研究探索心外膜脂肪的起源,可为心脏冠状动脉疾病的诊断和治疗提供新的研究方向和思路。博士生刘巧珍等利用转基因小鼠特异性标记追踪心外膜细胞发育的命运。结果发现,胚胎期标记的心外膜细胞除了分化成冠状血管平滑肌细胞外,还可形成心脏房室之间的脂肪细胞。但在成体中再度标记心外膜时却观察不到,这表明成体稳态中心外膜转变成脂肪的能力被抑制。研究证明成...
+
-
技术文章
控制ATCC细胞分裂是什么呢?
研究人员发现了一种能够控制ATCC细胞分裂的特殊酶类(DYRK3),这类酶是一种双特异性的激酶,当细胞分裂时,DYRK3酶就会促进不同相的混合,这就保证了细胞能够正确构建分离染色体及分裂细胞内容物的细胞机器,当细胞分裂后,酶类DYRK3就会被破碎,而且单一相就会再次形成。如果一切按照计划进行的话,遗传物质、细胞器以及细胞内容物就会在子代细胞中被正确分配,这些基础性的研究发现或许就能帮助研究人员深入理解细胞分裂的过程。研究者LucasPelkmans表示,细胞中的物理-化学过程...
+
-
技术文章
ATCC细胞如何指导分裂
ATCC细胞需要的了解其周围的环境,来自一个方向的信号也许会导致细胞作出针对其它方向信号*不同的应答。然而不幸的是,对于研究人员来说,这些关键的方向线索在他们将细胞从天然环境中取出,放到营养物质和生长因子的人工培养基里的时候,就已经丢失了。来自美国斯坦福大学医学院和霍华德休斯医学院的研究人员近期出了一种新方法,能模拟正常细胞空间环境的信号传导。利用这种方法,研究人员发现在人类胚胎干细胞细胞膜上有一种“现在进行分裂”信号,这种信号的位置能调控细胞平面分裂开始的位置。而且这也决定...
+
-
技术文章
干细胞生理活动的观察
实验方法原理干细胞是机体防御系统中能游走的单位。它分为粒细胞系、单核细胞系、淋巴系三类。它们有许多生理功能,如游走性、变形运动、趋化性、吞噬异物等。在白细胞中,以粒细胞、单核细胞的吞噬活动较强,故称此二类细胞为吞噬细胞。单核细胞由血液进入组织后逐渐演变成巨噬细胞。吞噬细胞主要靠吞噬来处理异物。吞噬细胞首先由于趋化作用而向异物游走,然后伸出伪足包围异物,并发生内吞作用形成吞噬泡将异物吞入细胞,继而溶酶体与吞噬泡融合消化异物。实验材料小白鼠试剂、试剂盒台盼兰刚果红仪器、耗材光镜注...
+
-
技术文章
ATCC细胞传代后形态不正常原因
血清是一种成分复杂的混合物,且对ATCC细胞生长具有促进作用,我们培养细胞离不开血清。那在大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴度的影响都有哪些表现?1、细胞生长速度缓慢,长满单层时间长;从同一细胞瓶中分出两瓶细胞,用同一种培养液,分别加入10%的对照血清和待检血清,在相同条件下培养72小时,会出现对照血清长满单层,而待检血清大约只有60~70%,这种血清就不适合用来大规模培养细胞。2、细胞传代后形态不正常,细胞状态发生变化;由于血清的质量问题,使原本状态正常的...
+