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干细胞重编程并不是我们想象的那样
一项研究指出,干细胞重编程的发生与我们的想象并不*一样。西班牙国家癌症研究中心CNIO的研究团队发现,组织损伤是细胞回到胚胎状态的一个关键因素。受损细胞会给旁边的细胞发送信号使其获得胚胎特性,进而促成组织修复。iPS细胞重编程为山中伸弥赢得了诺贝尔奖,也打开了再生医学的大门。该技术通过引入OSKM四个基因,使成体细胞回到胚胎状态,转变为多能细胞。ManuelSerrano及其团队分析了在活组织中用OSKM诱导重编程的过程。他们看到的现象改变了迄今为止人们对这一过程的普遍认识。...
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干细胞放化疗后再生的正调控作用
研究工作揭示了骨髓脂肪细胞对造血干细胞放化疗后再生的正调控作用,颠覆了过去脂肪细胞作为造血抑制物的经典认识。周波研究员为论文*作者和共同通讯作者,SeanJ.Morrison教授为论文另一共同通讯作者。研究同时被评为下期《NatureCellBiology》杂志封面文章。成年人腿骨中50%以上的空间被脂肪占据,这一比例在衰老或疾病发生后会进一步增加。骨髓脂肪细胞数量与生理或病理性骨髓抑制具有高度的相关性。因此,一直以来,脂肪细胞抑制骨髓造血被作为教科书般的常识。周波等人的工作...
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ATCC细胞的原代提取
目前,ATCC细胞的分离方法主要有三种:无血清培养基自然筛选法、流式细胞术分选法、免疫磁珠分选法。无血清培养基自然筛选法是迄今应用,也是zui简单和容易操作且行之有效的方法。其原理是利用特殊的培养基使成熟的神经细胞无法较长时间地成活,而分离筛选出能够在该培养条件下存活并繁殖的神经干细胞群体。步骤:(1)取胎脑;(2)用吸管吹吸使细胞分散均匀;(3)加小鼠神经干*培养基培养。脂肪间质干细胞分离培养脂肪干细胞主要是通过胶原酶进行消化,获得细胞悬液。分离培养大鼠脂肪间质干细胞的大致...
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干细胞不饱和脂质水平更高
“我们的研究表明,与非癌症干细胞相比,卵巢癌干细胞中的不饱和脂质水平显著增加,”Cheng表示,“传统方法不能进行单细胞分析,如果信号位于非常微小的区域,就不太容易通过常规生化检测方法观察,通过受激拉曼显微镜,我们可以通过代谢标志更好地确定这些细胞。在实验室培养的卵巢癌干细胞和来自人类患者的细胞中均鉴定出了脂质去饱和信号。在富集癌干细胞的肿瘤球体实验室培养物中也能够检测到较高的不饱和脂水平。研究人员使用化学物质抑制去饱和酶的活性,并降低细胞的“干性”(stemness),削弱...
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转化细胞的新测试
转化细胞新的测试,称为"多能测试"(PluriTest),具有收效大、、无需动物展开的多能性测试/特点。使用微阵列技术,能同时对数以千计不同的DNA序列进行分析。斯克里普斯研究小组开创了关于所有基因信息的大型数据库,这些基因活跃在正常的人体胚胎干细胞、诱导多能干细胞和许多的非多能细胞系中。对于多能测试,这个数据库对正常多能干细胞系建立了详细的分子模型。Loring说,与使用小的生物标志检测细胞的诊断测试不同,分子模型的方法使用了微阵列中的数千条信息。这个诊断测试的结果具有高度...
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装满培养液的干细胞如何处理?
很多人都会遇到从其他地方买来干细胞或者快递运来细胞,装满培养基的培养瓶的细胞怎么处理的问题。第1步:先放37℃培养箱放置4小时,这样细胞在通过长途跋涉以后得以稳定,观察细胞状态。第2步:将新鲜培养基和旧的培养基1:1稀释,如果细胞状态不好,可以将血清浓度提到15%,否则正常培养,这样有一个过渡期,不至于细胞换血清之后状态不佳,15%的血清培养48h之后换成正常浓度培养。细胞胞质疏松,状态不好,养不起来,怎么办?策略1:一般情况下,从血清下手就行,要么换好血清,要么提高血清浓度...
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ATCC细胞如何正确分离
ATCC细胞分裂是指细胞分裂为两个相同副本的过程。普通人的一生中要经历无数次的这一过程。为了生成两个*相同的副本,细胞必须地分离它们的染色体,这一事件依赖于称之为动粒(kinetochore)的专门结构将染色体双向附着到纺锤体微管上。在细胞分裂的早期阶段,动粒结合纺锤体微管会发生许多的错误。正常的细胞能够有效地纠正这些错误,确保染色体正确分离。而癌细胞通常不会纠正这些错误,使得子细胞染色体数目异常,从而帮助这些癌细胞抵抗化疗。达特茅斯Geisel学院生物化学教授Compton...
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ATCC细胞核移植技术
ATCC细胞从2-4月龄成熟母鼠获得,未成熟支持细胞从0-5日龄未成熟雄鼠获得。卵丘细胞通过透明质酸酶脱颗粒细胞获得。未成熟睾支持细胞获得方法如下:取下的小鼠睾用0.1mg/ml胶原酶与0.01mg/ml脱氧核糖核酸酶37℃处理30min,然后用0.2mg/ml胰蛋白酶37℃处理5min,去睾悬液即可。睾悬液用含4mg/mlBSA的PBS洗一下就可用于显微注射了。未成熟睾细胞根据其体积与形态即可确认。MII期受体卵母ATCC细胞在37℃条件下去核,操作液为含5µg...
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转化细胞外源基因导入的原理和操作步骤
转化细胞实验试剂1.细胞营养液(DMEM液体培养基,10%胎牛血清,双抗100单位/ml),消化液(0.05%胰酶,0.53mMEDTA·Na),Hank’s液。2.2×HBS液(280mMNaCl,10mMKCl,1.5mMNaHPO4·2H2O,12mM葡萄糖,50mMHepes,pH7.05,0.2μ过滤除菌),CaCl2(2.5M,0.2μ过滤除菌)溶液,超纯水(灭菌)。3.PBS,蛋白酶K,NP40,RNaseA,无水乙醇,酚,DNA上样缓冲液,琼脂糖,TAE电泳缓...
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干细胞疗法有助于视力恢复
英国两名“湿性”老年性黄斑变性患者接受胚胎干细胞疗法治疗,原本几近失明的眼睛恢复视力,能够视物、阅读,为治疗这种常见眼疾带来希望。黄斑是视网膜的重要区域。“湿性”老年性黄斑变性患者的视网膜色素上皮细胞因血管渗漏受损,造成视力模糊不清,严重时失明。英国穆尔菲尔德眼科医院利用人体胚胎干细胞培养出视网膜色素上皮细胞,将它嵌入一个支架中,形成一张40微米厚、6毫米长、4毫米宽的“补丁”。然后,他们把这张活细胞补丁植入患者失明眼睛的黄斑后,替代原来的病变细胞。整个手术耗时两小时。研究人...
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转化细胞电融合的原理和方法
转化细胞实验目的动物的游离细胞以及植物成微生物去壁后的原生质体,在电刺激下进行细胞融合,且融合率高、无毒性,操作简便及融合后的细胞继续培养成活率高等优点,是细胞工程手段的又一进展。实验原理将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细胞处于点接触状态,然后施加方波脉冲予以刺激,由于电脉冲的瞬间作用...
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转化细胞修复特定基因
转化细胞这项研究对于人类健康来说具有重要的意义,而且对于理解肿瘤的发育过程中细胞内部发生的改变十分有用。MMR缺陷将导致细胞变得更具肿瘤特性,这可能是与偶遇MMR缺陷的细胞缺少保护基因以及降低突变风险的相关机制。研究者们目前并没有向这一方向拓展的想法,但如果有人愿意深入研究的话将是十分有意义的事情。这项研究发现MMR能够特异性地修复特定基因,而不是对基因组上的非基因位点进行修复。这一发现将极大程度上促进我们对物种利用MMR修复基因突变的理解。“虽然基因对于物种的生物学功能的实...
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