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我司开展对癌细胞研究的研讨会
我司作为一个专业的生物公司,要想提升自身的能力,关注科研动态是必做的功课之一,今日,我司全体技术人员就一篇关于癌细胞研究的论文展开了研讨会。学术期刊《PLOSGENEtics》发表了一篇关于癌细胞的研究论文,该篇论文是由美国斯托沃斯医学研究所的JenniferL.Gerton教授带头的研究组和中山大学生命科学研究院附属口腔医院许宝山副研究员联合编写的,论文中指出癌细胞可“去繁从简”基因组中冗余的核糖体DNA重复序列来达到快速增殖的目的。我们的研究团队不仅认真研读了这篇论文,而...
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ATCC细胞实验室创新管理
鉴于ATCC细胞治疗实验室全过程,与药品质量管理规范(GMP)没有本质上的区别,借鉴GMP多年、成型的管理经验与模式,结合细胞治疗实验室自身的特点,建立适合开展体细胞免疫治疗技术的SOP是非常必要的。无菌操作培训→规范化操作演练→SOP建立与执行→监督管理措施到位→全程质量控制→增强社会效益。规模化的系列措施随着临床治疗刚性需求的增长,细胞培养的工作量不断增加,细胞培养师及工作面积趋于紧张,优化实验流程→发明、创新器材→解放力→建立弹性工作制(减少设备与实验室面积占用)→提高...
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干细胞传代实验
根据干细胞生长的恃点,传代方法有3种:悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)、贴壁生长细胞传代。培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打传代。实验步骤:1.贴壁细胞的消化法传代:(1)吸除或倒掉瓶内旧培养液。(2)D-Hanks液洗2~3次。(3)向瓶内加入适量消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使消化液...
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转化细胞的波动度
研究人员开始寻找转化细胞多潜能性(multipotency)——能够变成许多不同细胞类型的能力——的生物物理标志物。他们首先怀疑,细胞大小可能是一个因素,因为胎儿骨髓干细胞——往往具有较高比例的MSCs——通常直径较小。为了验证这一假设,研究人员使用Han以前开发的一种装置,根据肿瘤细胞的大小来捕捉循环的肿瘤细胞。他们根据大小分离骨髓细胞,发现较大细胞中没有一个是多能细胞,并非所有的较小细胞都具有多能性,所以仅仅凭大小不能区分MSCs。在对其他几个物理性状进行测量之后,研究人...
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转化细胞之间的共性
1.所有的转化细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜,即细胞膜。2.所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA。3.作为遗传信息复制与转录的载体。4.作为蛋白质合成的机器─核糖体,毫无例外地存在于一切细胞内。核糖体,是蛋白质合成的必须机器,在细胞遗传信息流的传递中起着*的作用。5.基本上所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。(少数不是,如蓝藻的有些种类从老细胞内产生新细胞)6.部分细胞能进行自我增殖和遗传(高度分化的细胞无法自我增殖。)7.新陈代谢。8....
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干细胞测序技术的关键
对干细胞进行单个分离、研究、和比较有助于细胞异质性和基因组不稳定研究。zui常见的单细胞测序应用是在肿瘤研究领域。哈佛大学终身教授、美国科学院院士谢晓亮教授是单细胞测序其中一种技术路线的人。2015年谢教授课题组在单细胞全基因测序研究领域曾取得重要进展,利用“eWGA”扩增方法,大幅提高了扩增的均匀性和准确性,可同时检测出单细胞中的小片段拷贝数变异和高精度的单核苷酸变异,该方法还具有基因组的高覆盖率,有效降低外源污染。这是一项经过改良的单细胞全基因组扩增(whole-geno...
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干细胞定期检测很重要
即使实验室没有新来的干细胞,支原体也可能通过操作人员传递到现有的培养物。当然,操作人员并不知道。支原体污染的另一条路线是通过你的细胞培养试剂。培养基、酶这些常用试剂,也有可能被支原体污染。尽管无法*避免人或试剂的污染,但常规检测也能避免情况恶化。也许,当支原体初次感染时,我们未必能检测到,但尽早发现,就能防止这种微生物的传播,避免大的损失。支原体检测有很多种。直接培养方法虽然准确率高,但需要三到四周的时间。因此,我们在常规检测中使用间接检测方法已足够,若发现阳性,则后续可采用...
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荧光染料对ATCC细胞染色的观察
ATCC细胞吖啶橙荧光染色的观察:吖啶橙是zui经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。1.将生长有培养细胞的玻片或鸡血涂片放入95%乙醇中固定15—30分钟,干燥;2.在1%醋酸中酸化30秒;3.在标本片上滴加足量的0.01%吖啶橙磷酸缓冲染液,染色5-10分钟;4.用pH4.8磷酸缓冲液洗1分钟;5.0.1mol/L氯化钙分化30秒或几分钟;6.PBS漂洗三次,每次数秒钟;7.在干净载玻片上滴—...
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ATCC细胞电融合方法
1、仪2S结构和使用方法JCF-型ATCC细胞电融事仪的各项技术参数是通过大量的融合实验数据,并参考岛津公司(日)SSH型电融合装置的参数值而设计的.当打开电源,指示灯亮,并拨通输出开关和正弦输出开关,选择和按下正弦频率按键(共分为0.6、0.8、1.3、1.5MHz五档),此时将输出电缆与示波器相接,在示波器上即出现高频正弦波形,当左右旋转正弦幅度旋钮,则正弦电压的p-p值,也随之降低和升高,如果将输出电缆与电融合室相接,则细胸相互连接.此时再旋动正弦幅度(即正弦电压)旋扭...
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转化细胞铺匀的技巧
做转化细胞实验,细胞铺板大概是zui常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。以下是我的一些技巧,希望可以帮助到大家。1.一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入,加完半边板后,将未加的细胞悬液混一下再,继续加剩余的半边板子,都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩...
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干细胞如何算是消化好了呢?
不是干细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成*分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是*成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是...
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转化细胞消化分离法
转化细胞组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。1、酶消化分离法酶消化分离法常采用胰蛋白酶和胶原酶,其分离方法如下:(1)胰蛋白酶分散技术胰蛋白酶(简称胰酶)是广泛应用的消化剂。胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要...
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