干细胞传代实验

根据干细胞生长的恃点，传代方法有3种：悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）、贴壁生长细胞传代。

培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。

实验步骤：

1.  贴壁细胞的消化法传代：

（1）吸除或倒掉瓶内旧培养液。

（2）D-Hanks液洗2～3次。

（3）向瓶内加入适量消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有细胞表面。

（4）然后吸掉或倒掉消化液后再加适量新的消化液，轻轻摇动再倒掉大部分消化液，仅留少许进行消化（也可不采用上述步骤直接加消化液进行消化）。

注意事项：

1.  胰蛋白酶要预温，温度37℃左右为宜℃。

2.  离心转速要合适，转速过低，不能有效分离细胞，离心速度过大，时间过长，会挤压细胞造成损伤甚至死亡。

3.  要定时观察干细胞，发现污染，应及时处理。

2183-17-7 1-萘磷酸钠盐 英文名称： CAS号： ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DISODIUM SALT

81012-89-7 1-萘磷酸钠盐(+4°C) 英文名称： CAS号： 1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE

67000-89-9 1-芘丁醇 99％ 英文名称： CAS号： 1-PYRENEBUTANOL

3443-45-6 1-芘丁酸;4-(3-芘基)丁酸 英文名称： CAS号： 1-Pyrenebutyric acid;4-(3-Pyrenyl)bytyric acid

19694-02-1 1-芘甲酸 97％ 英文名称： CAS号： 1-PYRENECARBOXYLIC ACID

711-79-5 1-羟基-2-乙酰萘 英文名称： CAS号： 1'-HYDROXY-2'-ACETONAPHTHONE

39968-33-7 1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑 (HOAt)（2-8℃） 英文名称： CAS号： 1-Hydroxy-7-azabenzotriazole

干细胞