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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 表达TNFα。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;400ug/ml G418
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
NCI-H1299(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2
HO-8910(人卵巢细胞)5×106cells/瓶×2
Bcap-37(人腺细胞)5×106cells/瓶×2
DU 145(人前列腺细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠下脂肪细胞*培养基100mL
AGS(人胃腺细胞)5×106cells/瓶×2
豚鼠心肌来源细胞英文名称:GPH4
3.5% NaC1甘露醇发酵管BR20支国产/进口
人肾动脉平滑肌细胞*培养基100mL
NZM肉汤/NZM BrothBR100克国产/进口Calcium carbide碳化钙75-20-7
Glycitin黄豆黄苷40246-10-4
cis-3-Hexenyl formate酸叶醇酯33467-73-1
Phenol酚108-95-2
1,4-Dibromobutane1,4-二溴丁烷110-52-1
4-(DIFLUOROMETHOXY)-3-(CYCLOPROPYLMETHOXY)-BENZALDEHYDE4-(二氧基)-3-(环丙基氧基)151103-09-2
D-Alanine tert-butyl ester hydrochlorideD-丙氨酸叔丁酯酸59531-86-1
TRI-M-TOLYLPHOSPHINE三间基基膦6224-63-1
DIAION HP-2MG, 100GM大孔吸附树脂
Chloramben氨二酸133-90-4
CYANINE花苷523-42-2
4-Aminobutyric acid4-氨基丁酸1956/12/2
TRIETHANOLAMINE HYDROCHLORIDE三乙醇胺酸637-39-8
PYRAZINE-2-CARBOXAMIDINE HYDROCHLORIDE2-吡嗪脒138588-41-7
(-)-FENCHONED(+)-茴香4695-62-9
N-Fmoc-S-(4-methoxybenzyl)-L-cysteineN-Fmoc-S-(4-氧基苄基)-L-半胱氨酸141892-41-3
Acetaldoxime乙肟107-29-9
N,N'-BIS(3-AMINOPROPYL)ETHYLENEDIAMINEN,N-二(3-氨丙基)乙基乙胺10563-26-5
Nebivolol hydrochloride奈比洛尔酸152520-56-4
(-)-MAACKIAIN马卡因19908-48-6
4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochlorideDAPI染色液28718-90-3
PROCAINE普鲁卡因59-46-1
4-(2-PYRIDYLAZO)RESORCINOL4-(2-吡啶偶氮)间二酚1141-59-9
人角膜内细胞*培养基100mL
酚红葡萄糖肉汤/Phenol Red Dextrose Broth蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验250克国产/进口
急性T淋巴细胞白血病英文名称:Jurkat(悬浮)
卵磷脂(大豆)/大豆卵磷脂/磷脂酰胆碱/L-a-磷脂酰胆酰/蜂王浆/SPCBR,PC=26%250/25/100/1000克国产/进口
大鼠脑膜细胞*培养基100mL
SW579(人甲状腺鳞细胞 )5×106cells/瓶×2