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更新时间:2017-01-05
厂商性质:经销商
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人肾癌细胞;A498价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人肾癌细胞;A498价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系由Aaronson S建立,源自一位52岁患有肾癌的女性病人。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA
传代方法 1:3~1:8传代;每周2次换液。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:26;D18S51:17;D19S433:18;D21S11:28,32;D2S1338:12;D3S1358:15;D5S818:11,13;D7S820:10,11;D8S1179:13,15;FGA:18,20;TH01:6,9.3;TPOX:8,10;vWA:8,11;
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
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Imatinib伊马替尼152459-95-5
Silicone DC-550硅 DC-550
Boc-Asp(Ochx)-OHBoc-L-天冬氨酸4-环己酯73821-95-1
1H-Pyrazole-1-carboxamidine hydrochloride1H-吡唑-1-脒酸4023/2/3
AZULENE奥苷菊环275-51-4
N-Ethyl-N-(2-hydroxyethyl)perfluorooctylsulphonamideN-乙基全基磺酰胺乙醇1691-99-2
4-[(2R,3R)-2,3-Dihydro-7-methoxy-3-methyl-5-[(E)-1-propenyl]benzofuran-2-yl]-2-methoxyphenol去氢二异丁香酚2680-81-1
1,4-Butanediol vinyl ether4-羟丁基乙基17832-28-9
2-CHLOROTHIOPHENOL2-硫酚6320/3/2
Guanidine nitrate酸胍506-93-4
TRANS-4-HYDROXY-D-PROLINE HYDROCHLORIDE反式4-羟基-D-脯氨酸酸142347-81-7
Tributyrin甘油三丁酸酯1960/1/5
Triethylene glycol dimethacrylate三乙二醇二基丙酸酯109-16-0
Copper disodium EDTA乙四乙酸铜14025-15-1
Sulfamic acid monosodium salt氨基磺酸13845-18-6
D-GLUCURONIC ACID SODIUM SALT葡萄糖酸14984-34-0
Cesium iodide碘化铯7789-17-5
2,3,4,5-Tetrachlorobenzoyl chloride2,3,4,5-四酰42221-52-3
COPPER(II) OLEATE油酸铜1120-44-1
2-Chlorocyclopentanone2-环694-28-0
Oroxylin千层纸素A480-11-5
3-Methoxy-1-butanol3-氧基丁醇2517-43-3
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