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绿色荧光蛋白标记人宫颈癌细胞;HeLa-GFP图片
产品简介:

绿色荧光蛋白标记人宫颈癌细胞;HeLa-GFP图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

产品型号:

更新时间:2017-01-07

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产品介绍

绿色荧光蛋白标记人宫颈癌细胞;HeLa-GFP图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 绿色荧光蛋白标记人宫颈癌细胞;HeLa-GFP图片
形态特性  上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性  转染pEGFP-N1,稳定表达绿色荧光蛋白。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;G418 200ug/ml
传代方法  1:3传代;5~7天1次。
传代情况 P5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR  Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16; D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

140595-100小鼠抗 Trx 标签蛋白单抗 100 μL
植物种属鉴定 PCR Mix 8100 次
L- 天门冬酰胺25g
果胶25g
COX IV 小鼠单抗1000 μL
CAS7681-49-4氟化25g
81225-250Tricine-SDS-PAGE 配胶液250mL
自诱导培养基 (lac 启动子 )200mL
罗丹明 B10g
糜蛋白酶原1 g
超氧化物试剂盒100 次
CAS9001-51-8己糖激酶2.5KU
131158-0.1山羊抗兔 IgG,荧光素 488 标记0.1mg
130829-50天净沙细胞蛋白质 -RNA 双提取试剂盒 50 次
N-2- 羟乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
髓核细胞生长因子5mL
电泳过硫酸铵0.1gx10
21-0400-5星形胶质细胞生长因子5mL
90710-100RNA  SDS( 十二烷基硫酸 )100gIminodiacetonitrile亚氨基二乙628-87-5
Sodium taurocholate牛磺胆酸145-42-6
HAFNIUM铪标准溶液7440-58-6
DIRECT FAST BROWN M直接红棕M2429-82-5
Octadecyl 3-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)propionate抗氧剂10762082-79-3
Tetrabutylphosphonium chloride四丁基化膦2304-30-5
DIETHYLAMINO HYDROXYBENZOYL HEXYL BENZOATE二乙氨基羟酰基酸己酯302776-68-7
Oxobutanedioic acid草酰乙酸328-42-7
CHLORIDE STANDARD离子(Cl-)标准溶液16887-00-6
NAECL化学发光液
2,4,6-Trimethylbenzoyl chloride2,4,6-三基酰938-18-1
2,6-DIMETHYLNAPHTHALENE二基萘28804-88-8
4-Methoxyphenylacetone对氧基基丙122-84-9
Giemsa stain吉氏色素51811-82-6
tert-Butyl hydroperoxide过氧化氢叔丁醇75-91-2
TRIFLUOROMETHANESULFONAMIDE三磺酰胺421-85-2
Oxazole-2-amine2-氨基恶唑4570-45-0
2,5,6-TRIMETHYLBENZOXAZOLE2,5,6-三基并唑19219-98-8
Calconcarboxylic acid钙试剂羧酸3737-95-9
Litmus paper blue蓝石蕊试纸
LEAD(II) SULFIDE硫化铅1314-87-0

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