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荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞；U2OS-Luc teT-on图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 荧光素酶转染人成骨肉瘤细胞；U2OS-Luc teT-on图片
形态特性  上皮样；多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性  表达荧光素酶，带四环素开关。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%Tet system 提供的胎牛血清；200 μg/ml G418
传代方法  1:2~1:4传代，每周2次换液。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12，13；D13S317：13；D16S539：11，12；D18S51：12，14；D19S433：15；D21S11：31；D2S1338：20，24；D3S1358：16，OL；D5S818：8，11；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：20；TH01：6，9.3；TPOX：11，12；vWA：14，18；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

小鼠抗 Flag 标签单抗1000μL
130651-100DNA 促旋酶 (E.coli)100U
51208A-0.5 dNTP 溶液，2.5mM0.5mL
天门冬酰胺酶250U
ER2566 菌种1mL
Hanks 溶液100mL
链霉亲和素，HRP 标记0.1mL
CAS79-06-1丙烯酰胺100g
131129C-100植物种属鉴定 PCR Mix 3100 次
XTT 细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒500 次
肝素琼脂糖50mL
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二1g
柱式昆虫 mtDNAout，测序10 次
CAS28166-41-8α- 氰基 -4- 羟基肉桂酸10g
12-229C600 菌种1mL
血液线粒体和核 DNA 双提试剂盒 25 次
红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mL
对硝基苯磷酸二盐1g
磷酸蛋白染色试剂盒10 次
CAS111-30-8戊二醛，25% 水溶液10mL
130899-100GAL 指示剂培养基100mL
胰蛋白酶，质谱100μgBOC-[15N]GLY-OHBOC-GLY-OH-15N106665-75-2
Tri-n-octylamine三胺1116-76-3
Cremophor EL聚氧乙蓖麻油EL61791-12-6
4-Fluoro-5-methoxy-2-methyl-1H-indole2-基-4--5-氧基-1H-吲哚288385-93-3
1-Hydroxy-7-azabenzotriazoleN-羟基-7-氮杂并三氮唑39968-33-7
N-Cbz-L-PhenylalanineN-苄氧羰基-L-丙氨酸1161-13-3
Tributyl borate酸三丁酯688-74-4
3-Aminopropyl-methyl-diethoxysilaneγ-氨丙基基二乙氧基硅烷3179-76-8
Bromo hydrazine溴化肼
3,5-Dinitro-2-methylbenzoic acid2-基-3,5-二基酸28169-46-2
3-(Dimethyl-octylazaniumyl)propane-1-sulfonate硫代甜菜 815178-76-4
Carrageenan卡拉胶11114-20-8
Lithium acetate dihydrate乙酸锂,二水6108-17-4
Ethyl hydrogen malonate丙二酸单乙酯1071-46-1
Pseudoginsenoside RT5拟人参皂甙 RT598474-78-3
Ciclopirox环吡胺29342-05-0
Brilliant Green Lactose Bile Broth煌绿乳糖胆肉汤
1-Chloro-2-iodobenzene邻碘615-41-8