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更新时间:2017-01-07
厂商性质:经销商
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人恶性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人恶性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]图片
形态特性 实体瘤
生长特性 体内生长
特征特性 利用培养的细胞系,进行裸鼠体内移植,形成实体瘤,冻存,可用于建立人黑色素瘤的体内移植模型。
培养条件 -
传代方法 制备成细胞悬液接种至免疫缺陷小鼠成瘤。
传代情况 C1
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体 -
使用权限 A类
人恶性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人恶性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人恶性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
DNA 洗脱液10mL
即用型荧光定量 PCR 试剂盒600 次
可逆性锌染试剂盒1套
CAS25952-53-8乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺1g
130883-50磷酸化蛋白纯化试剂盒50 次
Zinquin 乙酯5mg
链霉菌 PCR Mix 6100 次
1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装 )1000 支
Zinquin 乙酯5mg
β- 琼脂糖酶Ⅰ500U
18-0670-48游离脂肪酸测试盒48 T
80915B-100超杂交液 B(含甲酰胺)100mL
TE 缓冲液,PH7.010mL
非冻型细菌 RNA 保存液100mL
硼氢化氰5g
HRP 标记的抗地高抗体10μL
CAS92-71-72,5- 二苯基恶唑5g
12-219Tuner(DE3)plysS 菌种1mL
一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒30 次Niobium oxide化二铌1313-96-8
Chlorocyclohexane代环己烷542-18-7
METHYSTICIN麻醉椒苦素495-85-2
Ethyl 4-bromobutyrate4-溴丁酸乙酯2969-81-5
TRIS(2,4,6-TRIMETHOXYPHENYL)PHOSPHINE三(2,4,6 -三氧基基)膦91608-15-0
Kanamycin sulfate硫酸卡那霉素25389-94-0
ALPHA,ALPHA,ALPHA',ALPHA'-TETRABROMO-M-XYLENE间-双溴基36323-28-1
2-Amino-3,5-dichlorobenzonitrile2-氨基-3,5-二36764-94-0
2-Amino-3-pyridinecarboxaldehyde2-氨基-3-吡啶7521-41-7
Chlorodiphenylphosphine代二基膦1079-66-9
Pyruvic acid丙酸127-17-3
Carnauba wax棕榈蜡8015-86-9
NO3--N in Water酸氮标准溶液
(L-3-TRANS-CARBOXYOXIRANE-2-CARBONYL)-L-LEUCYLAGMATINE HEMIHYDRATEN-(反式-环氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺66701-25-5
人恶性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]图片X-PHOS2-二环己基磷-2',4',6'-三异丙基联564483-18-7
Cianidanol儿茶素154-23-4
RONGALITE吊白块149-44-0
2,6-Dinitrobenzaldehyde2,6-二基606-31-5
METHYLTRIOXORHENIUM(VII)基三氧化铼70197-13-6
4-BROMOBUTYRYL CHLORIDE4-溴丁酰927-58-2
Nitrocellulose lacquer thinner香蕉水
Calcium formate酸钙544-17-2