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更新时间:2017-01-07
厂商性质:经销商
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人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]图片
形态特性 实体瘤
生长特性 体内生长
特征特性 利用培养的该细胞系进行裸鼠体内移植,形成实体瘤,冻存;可用于建立人结直肠癌的体内移植模型。
培养条件 -
传代方法 制备成细胞悬液接种至免疫缺陷小鼠。
传代情况 P1
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体 -
使用权限 A类
人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
XL-10 gold 菌种1mL
甘油醛 -3- 磷酸脱氢酶500UN
β-D- 阿糖胞苷50mg
木材 DNAout50 次
CAS11028-71-0刀豆球蛋白 A Ⅲ50mg
12-25BL21(DE3)菌种1mL
血液 DNAout150 次
色素细胞生长因子5mL
弹性蛋白酶 ( 猪胰 )25mg
牛血清白蛋白标准品,2mg/mL1mL
CAS150399-99-8D- 葡萄糖 -1- 磷酸二1g
100827B-10菌种保存液10 管
伊红 Y, 醇溶性10g
交联琼脂糖凝胶 6B100mL
2,6- 二氯酚靛酚1g
山羊抗小鼠 IgG,荧光素 555 标记0.1mg
CAS1064-48-8氨基 10B5g
130578-1000小鼠抗 V5 标签单抗1000μL
植物 RNAout250 次
L- 谷胱甘肽 ( 氧化型 )1g2-Naphthyl benzoate酸萘酚酯93-44-7
Nodakenin紫花前胡苷495-31-8
2-(4-Iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-phenyltetrazolium chloride碘基四唑紫146-68-9
1-Hexanethiol1-己硫醇111-31-9
Phenyltrimethoxysilane基三氧基硅烷2996-92-1
2-(4-Diethylamino-2-hydroxybenzoyl)benzoic acid4-二乙氨基酸5809-23-4
CaulophyllineN-基野靛486-86-2
3-(N,N-Dimethylmyristylammonio)propanesulfonate3-磺丙基十四烷基二甜菜14933-09-6
1,4-Dimethoxybenzene对二150-78-7
Lithium hydroxide氢氧化锂1310-66-3
5-METHYLCYTIDINE5-基胞苷2140-61-6
Sesamin芝麻素607-80-7
2-Bromobutyric acid methyl ester2-溴丁酸酯3196-15-4
BOC-L-LEUCINOLN-叔丁氧羰基-L-亮氨醇82010-31-9
ZINC DIHYDROGEN PHOSPHATE磷酸二氢锌13598-37-3
5'-DEOXY-S-ADENOSYL-L-HOMOCYSTEINES-(5'-腺苷)-L-高半胱氨酸979-92-0
人结直肠腺癌瘤株;HCT 116 [HCT116]图片LIQUIRITIN(SH)甘草苷551-15-5
Trimethylolpropane triacrylate三羟基丙烷三丙酸酯15625-89-5
STRONTIUM OXIDE氧化锶1314-11-0
1,4-Diiodobenzene1,4-二碘624-38-4
Tetrahydropapaverine hydrochloride四氢酸6429/4/5
Methyl D-alaninate hydrochlorideD-丙氨酸酯酸14316-06-4