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更新时间:2017-01-07
厂商性质:经销商
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人急性T淋巴细胞白血病细胞;JurkatE6-1图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人急性T淋巴细胞白血病细胞;JurkatE6-1图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞是Jurkat-FHCRC细胞的克隆,是Jurkat细胞的衍生物。佛波酯或外源凝集素或T3单抗刺激后该细胞可产生大量的IL-2。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105~1×106 cells/ml之间,不超过3×106 cells/ml。
传代情况 C15
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:11;D18S51:13,21;D19S433:14,15.2;D21S11:31.2,33.2;D2S1338:19,23;D3S1358:15;D5S818:9;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;FGA:20,21;TH01:6,9.3;TPOX:8,10;vWA:18;
同工酶
染色体 46,XY
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
咪唑25g
dGTP 溶液,100mM0.5mL
大提柱式细菌 DNAout( 含溶菌酶 )4次
尿嘧啶糖基化酶抑制剂200U
CAS156-54-7丁酸1g
70602-30DNA 快速连接试剂盒30 次
一站式 His 标记蛋白质微量纯化套装20 次
克必隆 eTS 核心试剂盒10 次
可溶性淀粉100g
成骨细胞生长因子5mL
DNA DTT( 二硫代苏糖醇 )10g
140625-50双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC·7-AAD) 50 次
90602I-50DNA 电泳分子量标准 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次
十六烷基*基溴化铵25g
动物 DNAout250mL
对氨基苯磺酸25g
DNA Triton100mL
CAS657-27-2L- 赖氨酸盐酸盐25g
100837-10EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白10mL
柱式昆虫 mtDNAout,测序10 次
Monobromobimane [mBBR]25mgNADE23 纤维素
1,3-Dioxan-5-ol甘油缩86687-05-0
Fmoc-N-methyl-L-aspartic acid 4-tert-butyl esterFmoc-N-基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯152548-66-8
1-Adamantanemetha-金刚烷醇770-71-8
N-AcetylcaprolactamN-乙酰己内酰胺1888-91-1
5-BROMO-2-METHYLBENZENESULFONYL CHLORIDE5-溴-2-基磺酰69321-56-8
4-Iodopyridine4-碘吡啶15854-87-2
3-Methyl-2-benzothiazolinone hydrazone hydrochloride monohydrate酚试剂38894-11-0
S-ADENOSYL-L-METHIONINES-腺苷蛋氨酸17176-17-9
PanthenolDL-泛醇16485-10-2
2-Methylthiophenothiazine2-巯基吩噻嗪7643/8/5
Fluorescent Brightener 184荧光增白剂 1847128-64-5
ETHYL VIOLET乙基紫2390-59-2
4-METHYLUMBELLIFERYL PHOSPHATE4-基伞形磷酸酯3368/4/5
ALLYLTRIETHOXYSILANE丙基三乙氧基硅烷2550/4/1
Artemisia argyi oil艾叶油
Herbacetin草质素527-95-7
2-(4-((3-Chloro-5-(trifluoromethyl)-2-pyridinyl)oxy)phenoxy)-propanoic acid methyl ester高效吡禾灵72619-32-0
Isopropyl ether异丙108-20-3
Silicon carbide碳化硅409-21-2
3-Hydroxy-2-nitropyridine3-羟基-2-基吡啶15128-82-2
Praeruptorin B白花前胡乙素81740-07-0
Methyl 2-bromopropionate2-溴丙酸酯5445-17-0