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人胶质瘤细胞;GOS-3图片
产品简介:

人胶质瘤细胞;GOS-3图片售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。

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更新时间:2017-01-07

厂商性质:经销商

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产品介绍

人胶质瘤细胞;GOS-3图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞名称 人胶质瘤细胞;GOS-3图片
形态特性  多角
生长特性 贴壁生长
特征特性  由U-343MG衍生而来 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS + 4mM L-Glu
传代方法  1:3传代;3~4天1次。
传代情况 
冻存条件  基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR  Amelogenin:X,Y; CSF1PO:10,12; D13S317:9,13; D16S539:9,12; D18S51:23; D19S433:11.2,13,14; D21S11:31,33.2; D2S1338:22,24; D3S1358:15,17; D5S818:12,13; D7S820:9,11; D8S1179:13,14; FGA:19,20; TH01:6,9.3; TPOX:8,9; vWA:17,18;
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

140623-20双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-EGFP·PI)20 次
90602D-50DNA 电泳分子量标准 (3)λDNA/EcoR I50 次
湿润剂 P-40100mL
丁酰胆碱酯酶500U
溴甲酚紫5g
DNA  HEPES( 羟乙基乙硫磺酸 )100g
CAS103476-89-7亮抑酶肽2mg
130537-10钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液,10mg/mL10mL
柱式海洋动物 DNAout50 次
MMLV 逆转录酶10000U
ApaI2000U
微量 DNA 助沉剂0.1mL
柱式探针纯化试剂盒10 次
130552-500碱性磷酸酶,偶联500U
131042-25miRNA 荧光定量检测试剂盒25 次
Vinblastine( 长春新碱 )100μL
果胶酶100mgTETRAETHYLSILANE四乙基硅烷631-36-7
C.I. Solvent Yellow 90溶剂黄90
AMENTOFLAVONE穗花杉双黄1617-53-4
ACID GREEN 3酸性绿34680-78-8
NA水质氮氧化物(水剂)标样
NA水质总磷标样
4-Bromophthalimide4-溴邻二酰亚胺6941-75-9
Epmedin B羊藿定 B110623-73-9
Loperamide hydrochloride酸洛丁胺34552-83-5
NICKEL(II) SULFATE HEPTAHYDRATE硫酸镍10101-98-1
Bis[2-(2-benzothiazoly)phenolato]zinc(II)双[2-(2-并噻唑基)酚]锌58280-31-2
NA卟啉显色剂
Hypericin金丝桃素548-04-9
Ethyl methyl carbonate碳酸乙酯623-53-0
2,5-Dimethyl-3-hexyne-2,5-diol2,5-二基-3-己炔-2,5-二醇142-30-3
Isobutyl iodide碘代异丁烷513-38-2
Hexafluorozirconic acid六锆酸12021-95-3
Isobutyl isobutyrate异丁酸异丁酯97-85-8
3-Amino-4-chlorobenzamide3-氨基-4-酰胺19694-10-1
YTTRIUM NITRATE HEXAHYDRATE酸钇13494-98-9
Molybdenyl acetylacetonate乙酰丙钼17524-05-9
FLUORIDE STANDARD离子(F-)标准溶液16984-48-8
D-(+)-TURANOSED(+)-松二糖547-25-1
L- 胱氨酸25g
牛血清白蛋白封堵液250mL
CAS25988-63-0多聚 -L- 赖氨酸 (3-7 万 )25mg
130527-1哺乳动物蛋白酶抑制剂1mL

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