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Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526说明书
产品简介:

Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526说明书采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

产品型号:

更新时间:2017-01-07

厂商性质:经销商

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产品介绍

Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

产品名称Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526说明书
用途仅用科研
保存条件4℃保存一年;-20℃长期保存

细胞名称
形态特性  圆形
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  20%FBS;400ug/ml G418
传代方法  建议初始浓度2.0×105 cells/ml,1:3传代;4~5天1次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:26,26;D13S317:8,11;D16S539:10,10;D18S51:16,16;D19S433:14,16.2;D21S11:31,31;D2S1338:18,18;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;Penta E:10,10;TH01:7,7;TPOX:8,8;vWA:19,19;
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。胰蛋白酶干粉50g
胶原酶Ⅲ型100mg
玫瑰红盐5g
山羊抗小鼠 IgG,藻红蛋白标记0.1mg
CAS553-24-2中性红5g
130581-1000小鼠抗 mCherry 标签单抗1000μL
植物线粒体总蛋白提取试剂盒50 次
L- 赖氨酸盐酸盐25g
鱼藤酮1g
柱式微生物基因组 DNAout 50 次
CAS65099-79-8交联琼脂糖凝胶 2B100mL
81204-10SDS-PAGE 上样液,5×10mL
柱式植物 RNAout50 次
硫酸庆大霉素溶液 ,15mg/mL2mLEC 1.1.1.28乳酸脱氢酶9028-36-8
HEPTADECANOIC ACID十七碳酸506-12-7
1-Methyl-2-phenylindole1-基-2-基吲哚3558-24-5
4'-AMINOPROPIOPHENONE4-胺基丙70-69-9
(S)-(+)-1,2-Propanediol(S)-(+)-1,2-丙二醇4254-15-3
2-FLUORO-4-(TRIFLUOROMETHYL)BENZYLAMINE2--4-三基苄胺239087-05-9
Z-LYS(BOC)-OHZ-丁氧羰基赖氨酸2389-60-8
N-[(Trimethylsilyl)methyl]benzylamineN-[(三基硅)基]苄胺53215-95-5
6-METHOXY-2-METHYLBENZOTHIAZOLE6-氧基-2-基并噻唑2941-72-2
ETHYL 3-METHYL-4-OXOCROTONATE3-酰基-2-丁酸乙酯62054-49-3
NA树兰浸膏
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonylfluoride hydrochloride4-(2-氨乙基)磺酰酸30827-99-7
Lithium aluminium hydride氢化铝锂16853-85-3
Eleutheroside E刺五加甙 E39432-56-9
NUTRIENT BROTH NO. 4, FOR MICROBIOLOGY营养肉汤
Capillarisin茵陈色原56365-38-9
(1S,2S)-(-)-1,2-DIAMINOCYCLOHEXANE-N,N'-BIS(2'-DIPHENYLPHOSPHINOBENZOYL)(S,S)-DACH-基特罗斯特配体169689-05-8
Naphthalene萘91-20-3
Valeraldehyde正110-62-3
DNA 酶,Ⅱ型80U
CuZn/Mn-SOD 活性检测试剂盒 (WST 法 )100 次
CAS9001-05-2过氧化氢酶10mL
131146-100山羊抗人 IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μL
3071-50血液 RNAout 50 次
木瓜蛋白酶抑制剂溶液,0.5 mg/mL10mL
4- 氯 -1- 萘酚5g

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