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更新时间:2025-06-26
厂商性质:经销商
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人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78图片
形态特性 淋巴母细胞样;圆形
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞可产生IL-2,TNF-α;表达IL-2受体。H9 (ATCC HTB-176) 是HuT 78衍生出来的克隆。
培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 胎牛血清,20%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:11,12;D18S51:18;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:20,25;D3S1358:15,16;D5S818:11,12;D7S820:8,11;D8S1179:12,14;FGA:21,25;TH01:8,9;TPOX:8,9;vWA:14,15
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
12-196NMY51 酵母菌种1mL
130608-30AMV cDNA *链合成试剂盒30 次
LY294002(PI3K 抑制剂 )1mg
Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)1mg
130627-250核酸外切酶 T250U
伊红 Y 二盐,水溶性10g
3,3’,5,5’- 四甲基联苯胺二盐酸1g
DNA 电泳分子量标准 200-1500 bp)50 次
Tubulin-Tracker Red( 微管红色荧光探针 )40μL
CAS28822-58-43- 异丁基 -1- 甲基黄嘌呤250g
3073-200一管式病毒 RNAout200 次
DNA 电泳分子量标准 (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次
Southern 血液 DNAout10 次
131060-1GST 固定试剂盒1套
柱式石蜡包埋组织 DNAout30 次
一管式病毒 RNAout200 次
固相 RNase 清除剂250mL
双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 647·7-AAD)20 次
23-0770-2TLR4 激活剂2mL
糖原Ⅲ型500mg
3,5 二硝基水杨酸25gSilver nitrate酸银7761-88-8
Cyclobutyl chloride环丁基1120-57-6
NA内切酶(BAMH Ⅰ)
2-Amino-5-methylbenzoic acid2-氨基-5-基酸2941-78-8
Triclopyr绿草定55335-06-3
Chlorogenic acid绿原酸327-97-9
7-Nitroindole7-基吲哚6960-42-5
CITRIC ACID TRI-N-PROPYL ESTER柠檬酸三丙酯1587-21-9
2-Amino-5-nitrobenzophenone2-氨基-5-基二1775-95-7
CHLOROPHOSPHONAZO III偶氮膦Ⅲ1914-99-4
2-Chlorobenzyl alcohol2-苄醇17849-38-6
Quinoline喹啉91-22-5
Mildronate米屈肼76144-81-5
2,6-Pyridinedimethanol2,6-吡啶二醇1195-59-1
N-Boc-L-tert-LeucineN-Boc-L-叔亮氨酸62965-35-9
N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamideN,O-双三硅基乙酰胺10416-59-8
Glycidaldehyde diethylacetal环氧丙缩二乙醇13269-77-7
4-Methoxybenzyl bromide4-氧基溴苄2746-25-0
5,6-Dimethylbenzimidazole5,6-二基并咪唑582-60-5
YPG 液体培养基100mL
Phusion DNA 聚合酶250U
131088-5荧光素 (FITC) 标记亲和素5mg