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更新时间:2025-06-26
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人胃癌细胞;SNU-5图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人胃癌细胞;SNU-5图片
形态特性 上皮样
生长特性 多细胞聚集、悬浮生长
特征特性 该细胞来源于一名低分化胃癌患者的转移性腹水,1987年分离建立。该细胞表达CEA和TAG-72。
培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 20%FBS
传代方法 2~3天补液一次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
胶原酶Ⅳ型100mg
尿道上皮细胞生长因子5mL
CAS596-09-8二荧光素1g
130664-50*热稳定单链结合蛋白50μg
91203-30一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒30 次
尿嘧啶切刻酶50U
一步法无内毒素质粒 DNAout50 次
CAS573-58-0刚果红5g
柱式真菌 RNAout50 次
Congo Red 100mg
ATP 酶测试盒 ( 组织及细胞膜不需高速离心 )50 T
碘化丙啶苯10mg
CAS62-56-6硫脲25g
70703-50柱式分枝杆菌 DNAout50 次
EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白10mLNA三化碳酸二脂络合物
CARNOSOL鼠尾草酚5957-80-2
LIGHT GREEN SF YELLOWISH亮绿SF(淡黄)5141-20-8
Allyl phenyl ether丙基基1746-13-0
ETHYLLITHIUM乙基锂811-49-4
Black currant extrac加仑提取物
Swertiamarine獐牙菜苦甙17388-39-5
1-NAPHTHYLAMINE-3,6,8-TRISULFONIC ACID DISODIUM SALT HYDRATE8-氨基1,3,6-萘三磺酸二5398-34-5
Nickel oxide三氧化二镍1314-06-3
1,2-Dibromopropane1,2-二溴丙烷78-75-1
Bullatine B雪上一枝蒿乙素466-26-2
Dimethyl isophthalate间二酸二酯1459-93-4
Diisooctyl sebacate癸二酸二异酯27214-90-0
ISOPROPYLMAGNESIUM BROMIDE异丙基溴化镁920-39-8
1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane六溴环十二烷3194-55-6
2-CYANOETHYLTRIETHOXYSILANE3-三乙氧硅基919-31-3
Furfuryl acetate乙酸糠酯623-17-6
N,N-DIETHYL-P-PHENYLENEDIAMINE MONOHYDROCHLORIDEN,N-二乙基对酸2198-58-5
Lanthanum(III) nitrate hexahydrate酸镧10277-43-7
4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSIDE对基-α-D-葡萄糖吡喃苷3767-28-0
1-Naphthylacetamide1-萘乙酰胺86-86-2
6-Hydroxy-2-naphthoic acid6-羟基-2-萘酸16712-64-4
2-(Trifluoromethoxy)aniline邻氨基三氧基1535-75-7
PONCEAU 6R丽春红6R5850-44-2
1-Acetyl-4-piperidinecarboxylic acid1-乙酰基-4-啶酸25503-90-6
2,6-DIMETHYLHYDROQUINONE2,6-二基-1,4-二酚654-42-2
ZIRCONIUM锆粉7440-67-7
兔抗鸡 IgY,辣根过氧化物酶标记300μL
21-0170-5 角质细胞生长因子5mL
90509-5包涵体中量纯化试剂盒5次
60906-10cDNA *链合成试剂盒10 次
聚乙烯聚吡咯烷酮50g