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Hela 细胞耐药亚株；HeLa /DDP图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 Hela 细胞耐药亚株；HeLa /DDP图片
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  Hela/DDP细胞是湖医二院肿瘤所陈惠桢教授等用药物剂量增选法筛选获得的Hela细胞耐药亚株。该细胞除耐顺铂（DDP）外，其它特性均与Hela细胞系相似，可用于常规的耐药研究。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C30
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR  STR鉴定
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

CAS118-00-3鸟苷5g
60207-10氯溶液 ,25mg/mL10mL
乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺1g
酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次
丙烯葡聚糖凝胶 S-100 HR150mL
DNA  Acryl 助沉剂1mL
CAS1320-06-5油红 O5g
140595-100小鼠抗 Trx 标签蛋白单抗 100 μL
植物种属鉴定 PCR Mix 8100 次
L- 天门冬酰胺25g
果胶25g
COX IV 小鼠单抗1000 μL
CAS7681-49-4氟化25g
81225-250Tricine-SDS-PAGE 配胶液250mL
自诱导培养基 (lac 启动子 )200mL
罗丹明 B10g
糜蛋白酶原1 g
超氧化物试剂盒100 次
CAS9001-51-8己糖激酶2.5KU
131158-0.1山羊抗兔 IgG，荧光素 488 标记0.1mg
130829-50天净沙细胞蛋白质 -RNA 双提取试剂盒 50 次
N-2- 羟乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg柱式 DNA 清除剂50 次
CAS9010-34-8牛甲状素蛋白10mg
101112-50柱式水样 DNAout50 次
EHA105 农杆菌菌种1mL
山羊抗兔 IgG，藻红蛋白标记0.1mg
21-0220-5内皮细胞生长因子5mL
120654B-20Southern DNA Marker(DIG)20 次
130979-50柱式血清血浆 DNAout50 次
菌种保存液10 管
DiIC1(5) 碘化物100mg
131037-100Tfl DNA 聚合酶100U
溴甲酚紫5g
DEAE 纤维素100g
10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭菌带芯长尖 )96 支
植物种属鉴定 PCR Mix 4100 次
CAS94-75-72,4- 二氯苯氧5g
α-Tubulin 小鼠单抗30μL
超微量 ATP 酶测试盒 ( 可测总 ATPase)25 T
单细胞裂解液 (RNA)1mL
130574-1000小鼠抗 Flag 标签单抗1000μL