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更新时间:2017-01-11
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人舌鳞状癌细胞;CAL 27图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人舌鳞状癌细胞;CAL 27图片
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系于1982年建立,从一位56岁白种男性的病变舌中间部分取得,该细胞具高密度颗粒状胞浆。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR AMEL:X,X;CSF1PO:10,12;D12S391:18.3,20;D13S317:10,11;D16S539:11,12;D18S51:13,13;D19S433:14,15.2;D21S11:28,29;D2S1338:23,24;D2S441:10,11.3;D3S1358:16,16;D5S818:11,12;D6S1043:12,12;D7S820:10,10;D8S1179:13,15;FGA:25,25;Penta D:9,10;Penta E:7,7;TH01:6,9.3;TPOX
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
18-0740-24总抗氧化能力测试盒 ( 比色法 )24 T
70907-100去离子甲酰胺100mL
TG1 菌种1mL
非冻型组织 DNA 保存液250mL
Nα- 苯甲酰精氨酸乙酯10g
植物种属鉴定 PCR Mix 3100 次
CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 K-30100g
100831-1005- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)100mg
130834-500RNase 抑制剂 ( 猪源 )500U
牛血清白蛋白标准品,2mg/mL1mL
Calcein M 100mg
非冻型血液 DNA 保存液250mL
Protein G 琼脂糖1mL
120505-500Dam 甲基转移酶500U
130997-10Sephadex G50 介质10mL
TCEP 盐酸膦1g
电泳 TEMED1.5mL
TBE 电泳液 ,10×250mL游离甲状腺素(FT4)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人循环免疫复合物(CIC)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人类白细胞抗原C(HLA-C)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人叠氮胸苷(AZT)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人表皮生长因子受体2(Her2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人白介素22(IL-22)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人β1肾上腺素受体抗体(β1-AR)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人H1N1 抗体(IgG)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
犬维生素A(VA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
牛免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
DNA 修复混合液 30 次
131090-10中性亲和素蛋白10mg
130605-50即用型多重 PCR 试剂盒50 次
脱氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )25mg
放线酮溶液 ,100mg/mL1mL
甲叉双丙烯酰胺25g
M13mp18DNA10μg