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更新时间:2017-01-11
厂商性质:经销商
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人低分化鼻咽癌细胞株;CNE2-S22图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人低分化鼻咽癌细胞株;CNE2-S22图片
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 10%FBS
传代方法 无
传代情况 1:3传代,3-4天传1次
冻存条件 C5
支原体检测 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
STR 阴性
同工酶
染色体 未做
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
CAS147-94-4β-D- 阿糖胞苷50mg
12-236JM101 菌种1mL
亚精胺三盐1g
黄嘌呤1g
氢化可5g
荧光素 (FITC) 标记亲和素5mg
CAS50-01-1盐酸胍100g
120684-1噻孢溶液 ,100mg/mL1mL
乙二胺四 (EDTA)100g
酵母蛋白酶抑制剂1mL
盐酸四环素5g
链激酶100μg
CAS1400-61-9制霉菌素100mg
130590-100小鼠抗 HPC4 标签蛋白单抗100μL
植物种属鉴定 PCR Mix 5100 次
L- 丝氨酸10g
肌醇100g
VDAC1 小鼠单抗100 μL
CAS7647-14-5氯化100g
120642-30一站式 Blue Native PAGE 电泳套装30 次马β内啡肽(β-EP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
鸡雌激素(E)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
恒河猴主要组织相容性复合体(MHC/RhLA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠血栓前体蛋白(TpP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
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大鼠乳腺标志物-CA153ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠琥珀酸脱氢酶(SDH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠白细胞分化抗原30(CD30)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
大鼠P53抗体(P53-ab)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
GAM肉汤/厌氧菌液体培养基/厌氧菌肉汤/Anaerobic Broth用于专性厌氧菌培养250克组装/原装
猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
猪基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
植物维生素E(VE)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒组装/原装