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更新时间:2025-07-18
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小鼠杂交瘤细胞;EphA1图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;EphA1图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
3-(O-acetyloxime), 5-chloro-1-[(2,5-dichlorophenyl)methyl]-1H-Indole-2,3-dione, C30, LDN 57444LDN-57444
t-Butyl-2-((6S)-4-(4-chlorophenyl)-2,3,9-trimethyl-6H-thieno[3,2-f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-6-yl)acetateBromodomain Inhibitor, (+)-JQ1
2,KT5823
N-(2-Methoxy-2-oxoacetyl)glycine methyl esterDMOG
L-Threoascorbic acid, Antiscorbutic factor, Vitamin CL-Ascorbic acid
4-(N-Maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium saltSulfo-SMCC
Treponemycin; U 78548; C2989Borrelidin
(2R,4S)-ethyl 2-ethyl-4-(methoxycarbonyl)-6-(trifluoromethyl)-3,4-dihydroquinoline-1(2H)-carboxylate; CP-529414, CP529414, CP 529414Torcetrapib
N-(7-cyano-6-(4-fluoro-3-(2-(3-(trifluoromethyl)phenyl)acetamido)phenoxy)benzo[d]thiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamideTAK-632
(1aR,Ingenol
Sodium Pneumocandin A0, 1-((4R,5R)-4,5-dihydroxy-N2-(4-(5-(4-(pentyloxy)phenyl)-3-isoxazolyl)benzoyl]-L-ornithine)-4-((4S)-4-hydroxy-4-(4-hydroxy-3-(sulfooxy)phenyl)-L-threonine)-Micafungin sodium
Methyl (4,6-diamino-2-(1-(2-fluorobenzyl)-1H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl)pyrimidin-5-yl)(methyl)carbamate; RiociguatBAY 63-2521
N-Benzyl-2-(2,3-dihydro-1,4-benzoxazin-4-yl)-5,6,7,8-tetrahydroquinazolin-4-amine;CID49830260Ml241
Protease Inhibitor Cocktail II, EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail II
T20 (TBS) Blocking BufferEZBlock T20 (TBS) Blocking Buffer
Biotinylated Bovine Serum Albumin (Biotin-LC-BSA) (12 biotin/BSA)Biotinylated Bovine Serum Albumin (Biotin-LC-BSA) (12 biotin/BSA)
(±)-2,2’-bis(8-Formyl-1,6,7-trihydroxy-5-isopropyl-3-methylnaphthalene; NSC 56817; NSC 524336; BL 193; Pogosin(±)-Gossypol
星孢菌素Staurosporine131088-5荧光素 (FITC) 标记亲和素5mg
90708-1.5即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL
脱氧胆酸5g
放线菌素 D 溶液 ,1mg/mL1mL
四甲基乙二胺25mL
T4 RNA 连接酶 2( 截短型 )2000U
CAS90-44-8蒽酮25g
120513-20即用型蓝白 T 载体 C 型 (T7-T3,无 MCS)20 次
苷5g
钴柱介质10mL
庚烷磺酸1g
接头 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
CAS9004-54-0葡聚糖 T-50010g
12-107Rosetta-gami(DE3) 菌种1mL
液相内毒素清除剂100 次
JM109 菌种1mL
芥子酸1g
pNPP 干粉1g
CAS50-23-7氢化可5g
131232-10壮观溶液 ,50mg/mL10mL
吲哚 -3- 丁酸1g
聚乙二醇 4000250g
水解乳蛋白100g
小牛胸 DNA 溶液1mL
CAS25322-68-3聚乙二醇 8000250g