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更新时间:2025-07-18
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小鼠杂交瘤细胞;GFP图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;GFP图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交,细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗,可用于基础研究和临床检验。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
15-keto Prostaglandin F1α (10 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-13E-en-1-oic acid; 15-keto PGF1α; 15-keto Prostaglandin F1α
5-iPF2α-VI (50 ug)5,9。alpha。,11。alpha。-trihydroxy-(8。beta。)-prosta-6E,14Z-dien-1-oic acid; iPF2α-I; 5-iPF2α-VI
Lumula (5 mg)N-ethyl-9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-20a,20b-dihomoprost-5-en-1-amide; Maxeyprost|Unoprostone N-ethyl amide; Lumula
5-trans Latanoprost (50 mg)9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prost-5E-en-1-oic acid, isopropyl ester; 5,6-trans Latanoprost; 5-trans Latanoprost
17-trans Prostaglandin F3α (100 ug)9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E,17E-trien-1-oic acid; 17-trans PGF3α; 17-trans Prostaglandin F3α
Prostaglandin K2 (100 ug)9,11-dioxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; PGK2; Prostaglandin K2
20-carboxy Leukotriene B4 (50 ug)5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraene-1,20-dioic acid; 20-carboxy LTB4; 20-carboxy Leukotriene B4
15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2-d4 (100 ug)11-oxo-prosta-5Z,9,12E,14E-tetraen-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; 15-deoxy-Δ12,14-PGJ2-d4; 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2-d4
11(R)-HETE (100 ug)11R-hydroxy-5Z,8Z,12E,14Z-eicosatetraenoic acid; 11(R)-HETE
11(R)-HEDE (250 ug)11R-hydroxy-12E,14Z-eicosadienoic acid; 11(R)-HEDE
Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Solid Plate (1 ea)Precoated (Goat Anti-Mouse IgG) EIA 96-Well Solid Plate
Latex Beads-Rabbit IgG-FITC Complex (1 ea)Latex Beads-Rabbit IgG-FITC Complex
6-keto Prostaglandin F1α EIA Standard (1 ea)6-keto Prostaglandin F1α EIA StandardRhod-2,三盐1mg
DEPC 水100mL
大提柱式细菌 DNAout4次
尿嘧啶 -DNA 糖基化酶500U
CAS115-39-9溴酚蓝5g
12-194Y2HGold 酵母菌种1mL
一站式 His 标记蛋白质微量纯化套装20 次
克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成试剂盒10 次
直链淀粉250mg
PRMI1640 培养基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
DNA CTAB( 十六烷基*基溴化铵 )100g
140625-20双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-APC·7-AAD) 20 次
90602H-50DNA 电泳分子量标准 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次
十二烷基硫酸100g
动物 DNAout100mL
6- 苄基氨基嘌呤1g
链霉亲和素,AP 标记0.5mL
CAS27848-80-2L-(+) 乳酸锂盐5g
130541-10E-64 蛋白酶抑制剂,20mg/mL10mL
柱式昆虫 DNAout50 次
Monensin ( 蛋白转运抑制剂 )100mg
ATP 发光法细胞活力检测试剂盒200 次
动物 DNAout250mL
DNA 稀释液10mL
120403-300虾碱性磷酸酶300U
100409-56nt 随机引物,0.5μg/μL5μg
Western 印迹膜封膜液 ( 尼龙膜 )100mL