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【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！
产品名称：土壤几丁质酶可见分光光度法测试盒
规格 : 50管/24样
测试方法: 可见分光光度法
货号：GOY-01S6862
分类：土壤系列
商品介绍：
几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨)，以及真菌类的细胞壁中，而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解，具有抵御真菌侵染的作用，成为抗真菌病害的研究热点。

测定原理

几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖，进一步与对二甲氨基产生红色化合物，在585nm处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。

自备实验用品及仪器

天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板，甲苯、蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入40mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体18μL×1瓶，4℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体50mL×1瓶， 4℃保存；
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表：

样本的前处理
①总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
一步法质粒 DNAout 2.050 次  微量蛋白沉淀试剂盒50 次

一步法质粒 DNAout 2.0100 次  微量单链 DNA 定量试剂盒1mL

一步法无内毒素质粒 DNAout50 次  微量 RNA 助沉剂0.1mL

一步法大提质粒 DNAout5次  微量 RNA 定量试剂盒1mL

一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次  微量 DNA 助沉剂0.1mL

土壤腐殖酸清除剂100mL  预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (29:1)100g

一步离心式石蜡清除剂100 次  预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (19:1)100g

菌体内毒素清除剂200mL  鱼类种属鉴定 PCR Mix100 次

红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mL  荧光尺1个

红细胞裂解液 B 型 ( 流式细胞分析用 ) 100mL  银染清除剂30 次
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β-测试盒

β-胡萝卜素含量的测试

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土壤几丁质酶可见分光光度法测试盒m7G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD  电泳级 SYBR Green I50μL

G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD  电泳级 MOPS100g

G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD  第五章 核酸扩增产品

3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD  第四章 探针标记及检测产品

NTP 溶液，10mM0.5mL  第三章 “归去来"核酸电泳及回收产品
FBP活性计算：
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.1 mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。