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当前位置:首页产品中心生化试剂盒糖代谢系列β木糖苷酶微量法测试盒

β木糖苷酶微量法测试盒
产品简介:

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产品型号:

更新时间:2022-03-15

厂商性质:经销商

访问量:174

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产品介绍

商品介绍:
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

测定原理

β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算β-木糖苷酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿和蒸馏水。

产品名称:β木糖苷酶微量法测试盒
规格100/48
测试方法微量法
货号:GOY-01S6752
分类:糖代谢系列

试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4保存;
测定步骤
1
分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2
将试剂一、二、三37(哺乳动物)25(其它物种)预热10分钟。
3
加样表:

图1.jpg

样本的前处理
FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定。
胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)1510的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4200g离心5min,弃沉淀,取上清在48000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后48000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤提取粗酶液。
FBP活性计算:
1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmolNADPH定义为一个酶活力单位。
FBP
nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(W ×V÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反总:反应体系总体积,1×10-3 LεNADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.1 mLV样总:加入提取液体积,1mLT:反应时间,5 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
7号染色体开放阅读框61抗体     神经内分泌特异性蛋白2抗体

组织蛋白酶C抗体     神经内分泌肽QRFP抗体

半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗体     神经囊泡膜蛋白1抗体

活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗体     神经母细胞特异性转移因子抗体

末端补体复合物抗体     神经母细胞瘤源性分泌蛋白抗体
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产色链霉菌   西伯利亚库特氏菌  模式菌株

苏云金芽孢杆菌猝倒亚种   表面培养基60mm/25cm2

白色念珠菌冻干粉   成团肠杆菌(成团泛菌)


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