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技术文章
如何使ATCC细胞培养物适应培养基?
许多ATCC细胞系容易适应无血清培养基和无蛋白培养基,而对环境要求过高的其它细胞却难以适应变化,这就需要更为专业的方法来适应变化。而根据细胞系的特性,有两种方法可使细胞适应无血清培养基。*种方法是连续适应/循序隔绝法;另一种方法是直接适应。连续适应/循序隔绝法*种方法是连续适应/循序隔绝法。通过一系列的血清还原步骤,使细胞适应无血清培养基。这是优先选用的方法,且不对细胞培养环境形成太过恶劣的变化。连续适应/循序隔绝法——方法1使原培养基内的细胞连续地经过以下几个阶段:阶段1:...
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ATCC细胞培养的具体过程
一、ATCC细胞准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。二、取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的培养称为原...
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ATCC细胞抗衰老功效
ATCC细胞抗衰的功效:1.焕发皮肤活力和恢复容颜健康的皮肤光滑而富有弹性,新陈代谢功能旺盛。2.*新陈代谢功能新陈代谢是人体生命活动的物质基础。一提到干细胞很多人都是一头雾水,对于干细胞,临床上可以治疗多种疾病,对于美容界,干细胞抗衰老已经成为一种时尚,那么干细胞抗衰老有哪些功效?1、焕发皮肤活力和恢复容颜健康的皮肤光滑而富有弹性,新陈代谢功能旺盛。新生皮肤细胞来源与皮肤基础层的皮肤干细胞,毛发的健康生长也有赖于毛囊里的毛囊干细胞,而皮肤干细胞和毛囊干细胞就来源于血液干细胞...
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利用生物技术清除无用的肿瘤细胞
肿瘤细胞能发育成所有类型的细胞,为再生治疗带来极大希望。然而,通过干细胞的转化所生成的细胞类群也经常包含少量未分化的干细胞,这会引起肿瘤的形成。NatureCommunications上报告了可提高干细胞疗法安全性的一个“清除”程序。该方法利用一种只在干细胞上表达的细胞表面蛋白从混合细胞类群中将未分化的细胞清除。NissimBenvenisty及其同事发现,“tight-junction蛋白”Claudin-6只见于人多能干细胞表面上。他们接着提出基于抗体或一种细菌毒素来识别...
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转化细胞为什么会衰老?
关于转化细胞衰老的机理具有许多不同的学说,概括起来主要有差错学派(Errortheories)和遗传学派(Genetic/Programmedtheories)两大类,前者强调衰老是由于细胞中的各种错误积累引起的,后者强调衰老是遗传决定的自然演进过程.其实,现在看来两者是相互统一的。(一)差错学派细胞衰老是各种细胞成分在受到内外环境的损伤作用后,因缺乏完善的修复,使“差错”积累,导致细胞衰老.根据对导致“差错”的主要因子和主导因子的认识不同,可分为不同的学说,这些学说各有实验...
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人胚胎肿瘤细胞培养方法
肿瘤细胞为了能够适用于医学移植,人类胚胎干细胞(hESCs)需要保持一种“未分化”状态,即它们没有变换成其他类型的细胞。为了确定培养hESCs的方法能使它们保持未分化状态,也能生长、增殖和存活,研究人员经常使用动物来源的血细胞“饲养层”,通常来自于小鼠(小鼠胚胎成纤维细胞MEFs)。然而,这种方法存在各种污染问题,包括病原体和病毒的传播。为了避免污染问题,使用作为饲养层细胞,他们发现,MBMCs可以取代动物来源的饲养系统,用于培养人类胚胎干细胞,并能够使它们成长在一个未分化的...
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怎样开始肿瘤细胞重编程
肿瘤细胞环境有着超越基因组的影响,正因如此,大规模“组学"数据将是未来细胞重编程的一个重要方面。虽然我们认为iPSC和ESC在功能上是相同的,但转录组、蛋白质组和表观基因组水平的深入研究将有助于阐明环境对重编程的影响。另外,在单个细胞中同时检测多个“组学",将能鉴定那些造成iPSC多能性差异的基础元件。目前,细胞重编程领域普遍缺乏定量数据。实际上,文献中的重编程效率差异,可能更多的是由体细胞内部异质性造成的,而不是方法学上的问题。定量理解这样的异质性,可以帮助我们从细胞群体中...
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干细胞和癌变细胞之间的差异
目前为止,干细胞这种磁共振成像(MRI)技术,只检测试管中生长的细胞和小鼠,研究人员说:“我们认为,这是科学家们发现细胞黏菌成像的一种用法,当细胞发生癌变,其外膜上的一些蛋白质会脱落糖分子,并变得不黏滑,可能是因为它们拥挤的紧密结合在一起。如果我们调整MRI来检测附着于特定蛋白质上的糖分子,我们就可以看到正常。此项研究是基于其他研究机构zui近的调查结果,表明通过一种微调MRI技术,根据这种指示葡萄糖与周围水分子的*相互作用方式,可以检测到它们,而不需要施用染料。其他研究人员...
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肿瘤细胞清洗与灭菌
一、肿瘤细胞实验目的能独立地进行用于细胞培养的各种器皿的清洗与消毒,掌握干热灭菌法、湿热灭菌法和滤过除菌法的操作,了解化学消毒法的使用方法。二、实验原理清洗与消毒是组织培养实验的*步,是组织培养中工作量zui大,也是zui基本的步骤。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞养不好与清洗不*有很大关系。清洗后的玻璃器皿,不仅要求干净透明,无油迹,而且不能残留任何物质。如有毒的化学物质,哪怕残留0.1个,也可能影响细胞生长。灭菌手段的选择十分重要,对...
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肿瘤细胞培养递送siRNA*方法
由于肿瘤细胞使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。而siRNA转染途径也是一种常用的RNAi技术,那么本文在此介绍向培养细胞递送siRNA的*化方法。以下的所有建议适用于siRNA,确切地说,同样可用于递送siRNA模拟物/抑制剂。(1)进行实验时要保持一致条件优化后,应注意确保操作中每一步的顺序、时间和方式一致。整个实验中变动因素越少,实验结果的可重复性及可靠性越高。(2)转染时选择恰当的...
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绿色木霉对ATCC细胞有何作用?
【方法】ATCC细胞用海藻酸钠和氯化钙固定绿色木霉,将游离绿色木霉和固定化绿色木霉分别培养一段时间,离心培养液,用分光光度计法检测上清液中纤维素酶活性。在上清液中加入浓缩的小球藻悬浮液,用显微镜计数细胞壁破碎的小球藻。【结果】绿色木霉能同时分泌内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶及β-1,4葡萄糖苷酶3种纤维素酶,其中外切葡聚糖酶活性zui高。固定化绿色木霉反复使用5次后,分泌的纤维素酶活性能保持到初次的67.4%。市售纤维素酶、游离绿色木霉、固定化绿色木霉初次及第5次分解小球藻细胞壁...
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诱导性干细胞定向分化
日本学者山中伸弥将oct4、Sox2、Klf4、c-myc四个基因插入到成体干细胞DNA中重编程细胞恢复到胚胎干细胞状态,由此建立了iPS细胞。这些细胞可以向胚胎干细胞一样,转变为几乎所有的组织类型。为此,山中伸弥在2011年获得诺贝尔奖。虽然iPS细胞有潜力发育为任何组织器官,但如何诱导它们往正确的方向分化问题尚未解决。由中科院上海生命科学院/上海交大医学院健康科学研究所金颖教授带队的关于“基于诱导多能干细胞技术的若干重大疾病模型与机理研究”的“973”科技部重大科学研究项...
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