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蛋白质与肿瘤细胞的主要联系
肿瘤细胞是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法*的优点,从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种:固相合成和液相多肽合成。zui初有人用电泳证明血清中抗体活性在γ球蛋白部分,故曾把抗体统称为丙种(γ)球蛋白。后...
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转化细胞配置注意重点
转化细胞配置要点:1)确认培养基的成分,并称量;2)加入各个成分的顺序;3)准确调pH;4)适当的灭菌方法;5)无菌条件下分装。是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物,即生长因子。转化细胞有些微生物,如自养型微生物,不需要碳源,所以上述物质只具有一般性。虽然不同培养基配置的细节会有些不一样,但是重点步骤还是相同的。松罗酸20mg/...
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如何去除ATCC细胞中的沉淀?
如想去除ATCC细胞中这些絮状沉淀物,可以将血清分装到无菌离心管中,以400g离心,上清液即可直接加入到培养基内一起过滤。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。(1)细胞生长,我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,我们的客户以及其它血清商也证明了这一点。(2)过滤,如果血清中出现大量的沉淀物,血清将很难过滤。一般说来,因为在血清时zui后已经经过100nm或者40nm的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此不推荐再过滤用于细胞培养的血清。在实...
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肿瘤细胞通讯对细胞活动的作用
肿瘤细胞间通讯对细胞正常生理活动至关重要,也与肿瘤发生发展过程密切相关。近年来研究发现细胞间的一类隧道纳米管类似结构(tunnelingnanotube,TNT)能够介导细胞通讯,但其形成机制和生物学功能尚无统一定论。因此,发展特异识别这种细胞间通讯结构的分子探针有助于理解细胞间信息传递过程。研究人员利用基于活细胞的指数富集配基系统进化技术(Cell-SELEX)筛选得到了能与耐药肿瘤细胞MCF-7R高特异性、强亲和力结合的核酸适配体(aptamer)。以该核酸适配体构建的分...
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鉴定干细胞潜伏期的长短
一般情况下,干细胞贴壁速度慢,可达10-24小时或更多,而传代细胞系贴壁速度快,通常10-30分钟即可贴壁。细胞贴壁后还需经过一个潜伏阶段,才进入生长和增殖期.原代培养细胞潜伏期,约24-96小时或更长,连续细胞系和,仅需6-24小时。二、指数增生期(logarithmicgrowthphase)这是细胞增殖zui旺盛的阶段,分裂相细胞增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长是否旺盛的一个重要标志。通常以细胞分裂相指数(Mitoticindex,MI)表示,即细胞群中...
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干细胞的更新能力
干细胞具有惊人的更新能力,在维持人体功能正常运转起了举足轻重的作用。不同器官有不同情况,但总的来说,人体细胞每两天就要完成一个、磨耗和代换的过程。有些人体器官的细胞更新得非常频繁,它们的DNA复制过程必须无缺,否则会百病丛生。我们知道血液细胞的更新非常迅速,肠内膜的上皮细胞也一直不停地以新换旧。每一天有近170亿的上皮细胞被换掉,小肠的整个表皮每五天就全部更新一次。人类皮肤大约每27天更新一次,一生中更新的皮肤近千张。每小时中,我们的身体会抖落60万块皮屑,加起来每年有1.5...
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ATCC细胞特异性免疫效应
大多数ATCC细胞因子具有上调免疫功能的作用。其中IL-2、IL-12和IFN-γ对T细胞功能上调作用zui强;IL-4、IL-5、IL-6和IL-10对B细胞功能上调作用zui强。有些细胞因子可下调免疫功能,如TGF-β可抑血干细胞、T细胞、B细胞、上皮细胞和内皮细胞的生长,并可抑制巨噬细胞和NK细胞的吞噬和杀伤活性;IL-4、IL-410和IL-13可通过抑制巨噬细胞活化和抑制CD4+Th1细胞产生IFN-γ、IL-2和TNF-β等细胞因子的作用,下调细胞免疫功能;IFN...
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肿瘤细胞重组状态
重组肿瘤细胞因子要求:1.真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE,RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。2.纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。3.生物活性:进行相应的体外(invitro)或体内(invivo)活性检测。4.蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。5.内毒素:kineticLAL法检测内毒素。6.微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。重组...
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转化细胞的合成分泌
转化细胞理想的系统是凝胶降解的时间与组织生长的时间相匹配。“因此,我们希望在加入干细胞后,我们的热凝胶被细胞发育而成的组织所取代。”结果表明,PEG-L-PA热凝胶是一种很有前途的组织工程系统,在优化TMSC的配方、肝细胞生长因子及其他生化物质之后,可用于肝脏组织的再生。尽管扁桃体组织的充足使得TMSC成为干细胞治疗的理想候选,ELISA试剂盒一直缺乏一种靶向的导入方法,在体内植入TMSC。一些科学家试图直接注射干细胞,但干细胞只是被冲走,而没有组织生长。于是,将细胞分散在一...
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ATCC细胞是一个动态体系
ATCC细胞是一个动态体系,每时每刻都有大量的生化反应在进行。对于信号传导来说,这个系统充斥着高水平的噪音。那么细胞是怎样在这种条件下准确传递化学信号的呢?细胞对外界化学信号的应答,取决于自己的生理状态。但细胞生理状态存在显著的波动,比如说细胞中各种蛋白的含量会出现高达25%的变动。“这是相当大的噪音”。为了了解细胞如何编码化学信号的水平,上海科兴及其同事将显微成像与信息学理论结合了起来。他们研究了三个不同的化学通讯系统,钙离子、ERK和NF-κB。这三种类型的信号传导分别持...
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ATCC细胞过继性免疫细胞疗法
ATCC细胞即自体免疫细胞治疗技术。这是指将体外激活的自体或异体免疫效应细胞输注给患者,目的是借此杀伤患者体内肿瘤细胞。这也正是肺癌明智选择共识中所涉及的免疫细胞治疗部分。“从上世纪80年代中期起,细胞生物治疗兴起,几乎所有疾病都接受自体血回输的淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)治疗,而2008年该技术又‘改头换面’出现,名字换成了‘细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)免疫治疗’。时至今日,此技术在全国各地广泛开展起来,但有关前瞻性、回顾性的临床研究都不能为其提供充足的证据支持...
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影响干细胞质量的因素
干细胞质量保证是一个复杂的过程,许多重要的环节都影响到检测的质量。现分述如下:一、方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法,其中竞争抑制法因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响,结果重复性较差,质量较难控制。二、试剂因素1.试剂的选择:免疫检测的原理均基于抗原抗体反应。由于该反应过程受多种因素的影响,如普遍存在基质效应、交叉反应等,因而检测结果难以溯源,不同方法、不同试剂之间甚至同一试剂不同批号间结果均缺...
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