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揭密ATCC细胞的致命弱点
研究发现了ATCC细胞的弱点。他们发现了一种名为5-脂氧合酶(5-LO)的酶类在急性髓性白血病干细胞的生存过程中扮演着重要角色。此前研究人员已经发现了5-LO在炎性疾病比如哮喘症发病中的角色,研究者JessicaRoos教授表示,这项研究中我们发现,急性髓性白血病亚群中的白血病干细胞或许可以被5-LO抑制剂有效地选择性攻击,而且这种现象均可以在细胞培养基模型和白血病小鼠模型中观察到。研究者表示,这项研究为开发新型的5-脂氧合酶抑制剂来抑制白血病的存货,从而为抑制并治疗急性髓性...
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如何做到无菌环境培养ATCC细胞
我们在做ATCC细胞培养时,是必须要在无菌的环境下进行的,那细胞培养所需的无菌环境,我们如何做到呢?一、无菌室无菌室的结构:一般由更衣间、缓冲间、操作间三部分组成。无菌室的消毒和防污染:为保持无菌状态,经常消毒是必要的,通常采用每日(使用前)紫外照射(1-2小时),每周甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸(2小时)和每月新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。实际工作中,要根据无菌室建筑材料的差异来选择合适的消毒方法。此外,还应注意防止无菌室的污染。造成无菌室污染的可能包括:送入无菌室...
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肿瘤细胞实验中标记蛋白有哪些优点
肿瘤细胞实验中标记蛋白在测定过程中,具有一定的优点。这些优点为我们做实验提供便捷快速的服务流程,作为标记物一般用于两个目的:①蛋白检测:即标记物的引入使得能够检测细胞表达系统中的标记蛋白,从而可对蛋白的功能、蛋白质在细胞的定位以及相互作用和生化活性进行研究;②蛋白纯化:即选择一种可以与某种固相化配体结合的标记物,从而可以从细胞抽提物中批量纯化蛋白。标记蛋白具有许多优点。原则上,该方法为检测各种细胞成分中感兴趣的蛋白提供厂新的手段。①如果开放阅读框已经被克隆化,但是由于蛋白是新...
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ATCC细胞支原体污染的荧光检测方法
ATCC细胞利用萤光染剂(bisbenzimide,Hoechst33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。测试步骤用间接步骤,将待测细胞悬浮液或细胞培养液接种于指示细胞培养液中(indicatorcell,例如Ve...
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简单实用的ATCC细胞冻存方法
ATCC细胞冻存液:一般用10%DMSO(推荐用sigema原装的,质量好不用预消毒)+10%血清的*培养基,如果细胞珍贵的话用10%DMSO+90%全血清。降温方法:用zui少两厘米厚的医用棉纱将冻存管紧紧包裹,扎紧,直接放入-70度冰箱,隔夜取出冻存管直接放液氮冻存。复苏效果对比:细胞冻存2周后复苏,本方法冻存的细胞与使用程序性降温仪冻存的细胞复苏效果相差不大,但明显比传统4度、-20度、-70度的方法要好,传统的冻存方法不但费时费力,而且各时间段的放置时间并无严格统一,...
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皮肤细胞将转化为转化细胞并保持活力
如今科学家们能够利用多种方法将一种转化细胞类型转化成为其它细胞类型,其中所涉及的一种技术就是将成熟细胞转化成为多能性干细胞,随后利用化学混合制剂诱导多能干细胞使其分化成为所想要的细胞类型。在过去几年里,科学家们开始开发一种折中的方法,这种方法能够让皮肤细胞“时光倒流”,以便皮肤细胞失去成熟细胞的特性,并且变得和干细胞一样。研究者JaleesRehman指出,这种方法并不能让细胞*恢复至多能干细胞的状态,但却可以使其进入到一种中间前体细胞的状态,祖细胞能够被大量培养用于再生医学...
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ATCC细胞固定后之抗原修复
ATCC细胞大多数甲醛固定的组织在开始染色之前都需要先修复抗原,这是由于在固定过程中产生了亚甲基桥使蛋白之间交联屏蔽了抗原位点。两种抗原修复方法为热修复法(称之为热诱导抗原表位修复或HIER)和酶解法。这些修复方法原理都是将亚甲基桥打断,使抗原表位暴露出来,以便于抗体结合。有的抗原适合酶解修复,有的抗原适合热修复。酶解修复有时会损坏组织的形态结构,因此需要摸索酶浓度和作用时间。热修复法热抗原修复方法有高压蒸汽法、微波法或蒸煮锅法。或者将玻片置于修复溶液中60°C水浴过夜。除非...
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ATCC细胞老化的表现及预防方式
ATCC细胞老化的原因和预防1)接种密度的影响:部分干细胞具有一定的分泌性能,能够分泌一些对细胞有支持能力的因子类物质;所以必须维持一定的接种密度,否则会导致细胞增殖减慢,zui后出现老化;2)消化过度:消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞老化和分化;3)合适的密度的时候就要传代:细胞如果过密,接触抑制作用会导致细胞的活力减弱并影响增殖导致老化;4)使用合适的血清和培养基:不同的干细胞对培养基特别是血清...
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介绍肿瘤细胞四阶段
肿瘤细胞的生命是一个持续更新、持续从头开始的过程。从它的母细胞分裂开始,到它的子细胞形成或细胞自身死亡结束。而细胞周期就是指从一次细胞分裂形成子细胞开始,到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程。细胞在这种前期、生长、DNA复制和分裂等阶段间循环。一直以来,区分细胞这4个阶段并非易事,因为要同时对来自许多不同报告蛋白(作为报告基因的蛋白)的信号进行成像,在技术上是非常困难的。为了克服这一限制,美国斯坦福大学研究人员迈克尔·林及其同事,此次开发了一种名为mMaroon1的荧光...
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分析恶性生殖干细胞肿瘤分子开关
恶性生殖干细胞肿瘤是一种各个年龄段男女都可能罹患的癌症,如睾丸癌、卵巢癌皆属于此列。虽然目前的化疗疗法可在一定程度上治疗该类疾病,但化疗产生的副作用也很严重,会损害患者的听力,造成肾脏、肺叶以及骨髓损伤。zui近,英国剑桥大学研究人员称,一种名为LIN28的蛋白在恶性生殖细胞肿瘤的形成过程中起着重要作用,是促发癌症的关键“开关”。这一发现对于开发新的恶性生殖细胞肿瘤治疗方法具有重要意义。在该项研究中,剑桥大学研究人员发现,所有的恶性生殖细胞肿瘤中都含有大量的LIN28蛋白,该...
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ATCC细胞毒试验的几种方法
ATCC细胞毒试验实在组织培养中研究淋巴细胞、抗体或抗体依赖性淋巴细胞杀伤靶细胞的一种技术,也是在体外研究特异性细胞免疫比较可靠和灵敏的方法,目前微量细胞毒试验是应用zui广的一种方法.(一)淋巴细胞对肿瘤细胞的细胞毒试验方法:1)肿瘤细胞培养物制成悬液,并稀释至需要的细胞浓度.2)于微量试验班的小孔内分别接种0.2ml肿瘤细胞(内含5×102)个细胞,37℃培育24h.3)细胞贴壁后,轻轻轻去培养基,加1mlPBS洗涤,轻去洗涤液及未贴壁细胞.4)向小孔分别加入0.2ml不...
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转化细胞可测量时间的大脑神经元
转化细胞这项研究中,研究者让猴子只依赖内部感官来感知时间的流逝,这项实验的设计可以消除所有可以作为外部“时钟”的线索。研究者训练猴子,让其在没有任何外部提示或者奖励的情况下,眼睛以固定的时间间隔进行移动。研究者发现尽管缺少感觉信息,猴子依然可以准确持续地进行这种行为,猴子这种持续性行为的存在或许因为大脑中特殊区域-侧顶叶(LIP)的活性而致。更有意思的是,研究人员发现,猴子在任务期间大脑LIP的活性与处于外部有提示或者奖励的情况下大脑中的LIP的水平不同。近日,来自明尼苏达州...
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