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人肾上腺皮质腺癌细胞；NCI-H295R图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人肾上腺皮质腺癌细胞；NCI-H295R图片
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系源于多能肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295，后者由Gazdar AF等建立，从肾上腺皮质的肿瘤中分离而来。NCI-H295细胞经改变培养条件获得了NCI-295R细胞，群体倍增时间从原来的5天减为2天。NCI-295细胞悬浮生长，而NCI-H295R呈单层贴壁生长。NCI-H295R细胞保留了产生雄激素的能力，对血管紧张素Ⅱ和钾离子有反应。 
培养条件  DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  Nu-Serum I, 2.5%；15 mM HEPES＋0.00625 mg/ml insulin＋0.00625 mg/ml transferrin＋6.25 ng/ml selenium＋1.25 mg/ml bovine serum albumin＋0.00535 mg/ml linoleic acid
传代方法  1:3~1:4传代；每周换液2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：10，12；D13S317：13；D16S539：11；D18S51：17；D19S433：13；D21S11：32.2；D2S1338：25；D3S1358：15，16；D5S818：12；D7S820：9，12；D8S1179：13；FGA：19.2，24；TH01：9.3；TPOX：8；vWA：17，18；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

黄嘌呤氧化酶5u
非变性蛋白分子量标准25mg
CAS5704-04-1N- 三 ( 羟甲基 ) 甲基甘氨酸10g
131108-1ONPG 干粉1g
β-D- 阿糖胞苷50mg
MEQ，(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )100mg
1，3-二[三(羟甲基)甲氨基]丙烷5g
抑制与产生超氧阴离子自由基测试盒 ( 比色法 )50 T
酸洗玻璃珠系列10g
131288-250Maximov 固定液250 mL
81103-25一站式真菌 mRNAout25 次
柠檬酸 ( 无水 )100g
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
Indo-1，五铵盐1mgGlyoxylic acid monohydrate乙酸水合物563-96-2
Sodium dehydroacetate脱氢醋酸4418-26-2
KASUGAMYCIN HYDROCHLORIDE HYDRATE春雷霉素酸19408-46-9
D-Phenylalanine methyl ester hydrochlorideD-丙氨酸酯酸13033-84-6
COPPER(II) HEXAFLUOROACETYLACETONATE HYDRATE, 98双(六乙酰丙)合铜(II)水合物155640-85-0
2-BROMO-5-METHOXYANILINE2-溴-5-氧基胺59557-92-5
Sodium 1-octanesulfonate1-烷磺酸5324-84-5
Furfuryl thioacetate乙酸糠硫醇酯13678-68-7
5-BROMO-4-CHLORO-3-INDOLYL B-D-5-溴-4--3-吲哚基-BETA-D-葡糖苷酸环己胺114162-64-0
2,6-Difluoroaniline2,6-5509-65-9
1-PHENOLPHTHALEIN1-酚酞
2-Amino-4-chlorobenzoic acid2-氨基-4-酸89-77-0
4-N-PROPOXYBENZALDEHYDE4-丙氧基5736-85-6
Hydroxyurea羟基脲127-07-1
2,2'-Biquinoline2,2'-联喹啉119-91-5
NA3%化胰胳胨大豆琼脂
2-Azabicyclo[2.2.1]hept-5-en-3-one2-氮杂双环[2.2.1]庚-5--3-49805-30-3
环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次
22-0430-10Lucigenin( 光泽精 )10mg
90901-200菌体内毒素清除剂200mL