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更新时间:2017-01-07
厂商性质:经销商
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人肝癌细胞;Hep3b价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人肝癌细胞;Hep3b价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 Hep-3b细胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7岁黑人男童。该细胞产生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗胰蛋白酶(alphal-antitrypsin)、转铁蛋白、补体(C3)、C3活性载体,纤维原等,具有广泛的研究价值。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:4~1:6传代,每周换液2次
传代情况 C2
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:8;D13S317:12,14;D16S539:10;D18S51:20;D19S433:12.2,14;D21S11:30,31;D2S1338:21,25;D3S1358:15,OL;D5S818:13;D7S820:8,10;D8S1179:12;FGA:18;TH01:6,7;TPOX:9;vWA:17;
同工酶
染色体 60~82
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
T7 核酸内切酶 I250U
CAS58-85-5D- 生物素 ( 维生素 H)1g
12-267GS190 酵母菌种1mL
一管式植物 DNAout500 次
可溶性两性霉素 B25mg
葡聚糖 T-50010g
HAT 筛选培养基500mL
尼龙膜,13×20cm1张
140634-500MTS 细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒500 次
70503Z-50DNA 电泳分子量标准 (300-10000 bp)50 次
生物素化的碱性磷酸酶 (AP)1mg
淀粉样 β- 蛋白片段 25-35250μg
丙酮酸25g
NP-40 裂解液100mL
CAS5989-81-1α- 乳糖100g
130543-25α2巨球蛋白25Inh.U
柱式分枝杆菌 RNAout50 次
miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×10mL
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μLDL-2-AMINOOCTANOIC ACID2-氨基酸2187/7/7
4-N-OCTYLOXYBENZALDEHYDE4-氧基24083-13-4
N-Methyl pyrrole1-基吡咯96-54-8
N-Acetylsulfanilyl chloride对乙酰胺基磺酰121-60-8
Trityl azide叠氮化三基烷14309-25-2
3-METHYLCYCLOHEXANONE3-基环己591-24-2
6-CARBOXYFLUORESCEIN DIACETATE6-羧基荧光素二乙酸酯3348/3/6
4-ACETAMIDOCYCLOHEXANOL4-乙酰氨基环己醇23363-88-4
4-Hydroxyquinoline4-羟基喹啉611-36-9
METHYL 4-HYDROXY-3-IODOBENZOATE4-羟基-3-碘酸酯15126-06-4
2-ACETYLCYCLOHEXANONE2-乙酰基环己874-23-7
SILVER DIETHYLDITHIOCARBAMATE砷试剂1470-61-7
1,3-Dichloro-2-propa,3-二丙醇96-23-1
5-Hydroxyindole5-羟基吲哚1953-54-4
6-Methyl-1-indanone6-基-1-茚24623-20-9
2-Benzothiazolol2-羟基并噻唑934-34-9
Boc-D-aspartic acid 4-benzyl ester叔丁氧羰基-D-天冬氨酸 4-苄酯51186-58-4
2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediolmono(2-methylpropanoate)2,2,4-三基-1,3-二醇单异丁酸酯25265-77-4
2,3-Dichlorothiophene-5-sulfonamide2,3-二噻吩-5-磺酰胺256353-34-1
Southernwood Oil蒿油
benzoylmesaconine酰新乌头原63238-67-5
O-[2-ACETAMIDO-2-DEOXY-D-GLUCOPYRANOSYLI(1Z)-2-(乙酰基氨基)-2-脱氧-N-[[(基氨基)羰基]氧基]-D-葡萄糖酸肟 DELTA-内酯132489-69-1
p-Toluenethiol对硫酚106-45-6