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Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538说明书
产品简介:

Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538说明书采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

产品型号:

更新时间:2017-01-07

厂商性质:经销商

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产品介绍

Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

产品名称Cas9稳定表达的人肺癌细胞;A549-Cas9-538说明书
用途仅用科研
保存条件4℃保存一年;-20℃长期保存

细胞名称
形态特性  上皮样;多角形
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使A549细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS;400ug/ml G418
传代方法  1:3~1:8传代;每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR  Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D12S391:18,19;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,17;D19S433:29,29;D21S11:29,29;D2S1338:24,24;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:11,13;D7S820:8,11;D8S1179:13,14;FGA:23,23;Penta E:7,11;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:14,14;
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。M15 菌种1mL
2,4- 二氯苯氧5g
神经氨酸酶检测试剂盒100 次
通用型 LAMP 试剂盒50 次
131276-250Baker 甲醛钙中性固定液250 mL
130971-50柱式病毒 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
鸟嘌呤5g
96 孔板病毒 DNAout( 离心法 )1次
DiI( 细胞膜红色荧光探针 )10mg
硝酸纤维素膜,13×20cm1张
22-0270-10DiO( 细胞膜绿色荧光探针 )10mg
3660-250非冻型组织 DNA 保存液250mL
葡聚糖凝胶 G-50 中颗粒25g
苯酚红5g
U0126(MEK1/2 抑制剂 )1mg
核酸外切酶 I750U
23-0840-1Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor)1mg
70702-50分枝杆菌 DNAout50 次
Rosetta 菌种1mL
超氧化物歧化酶测试盒48 TDibutyltin maleate二丁基马来酸锡1978/4/6
DIFORMYLIMIDE SODIUM SALT二酰氨基18197-26-7
5-Bromo-2-fluorobenzonitrile5-溴-2-179897-89-3
Potassium methoxide醇钾865-33-8
DL-HomoserineDL-高丝氨酸1927-25-9
2-Fluoro-4-nitrotoluene2--4-基1427-07-2
4-NITROPHENYL-N-ACETYL-BETA-D-GLUCOSAMINIDE4-基基-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷3459-18-5
SINIGRIN MONOHYDRATE介子苷64550-88-5
beta-Diphosphopyridine nucleotide烟酰胺腺嘌呤双核苷酸53-84-9
Cyclobutylamine环丁基胺2516-34-9
NAtris 乙酸
1-Boc-4-(aminomethyl)piperidine4-氨基基-1-Boc-啶144222-22-0
(5E,9E)-6,10,14-Trimethylpentadeca-5,9,13-trien-2-one法尼基丙1117-52-8
2-Bromo-2-methylpropionic acid2-溴代异丁酸2052/1/9
N-AcetylethylenediamineN-乙酰基乙1001-53-2
Twofold Lactose Bile Salt Broth双料乳糖胆胨水
CALCIUM PYROPHOSPHATE焦磷酸钙7790-76-3
CHLOROXURON枯草隆1982-47-4
Abscisic acid脱落酸14375-45-2
CHLOROFORM-D氘代仿-d865-49-6
(+/-)1-(1-Naphthyl)ethylamine1-萘乙胺42882-31-5
6-Undecanone6-十一927-49-1
Xylene Cyanole FF二FF2650-17-1
1-TRIMETHYLSILYLMETHANOL三基硅基醇3219-63-4
DEPC 水100mL
大鼠内皮细胞分离液 1.066200mL
18-0210-48超氧化物歧化酶测试盒48 T
101218-100DNA  Tris Base( 三羟甲基氨基甲烷 )100g

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