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Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;MCF7-Cas9-542说明书
产品简介:

Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;MCF7-Cas9-542说明书采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

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更新时间:2017-01-07

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产品介绍

Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;MCF7-Cas9-542说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

产品名称Cas9稳定表达的人乳腺癌细胞;MCF7-Cas9-542说明书
用途仅用科研
保存条件4℃保存一年;-20℃长期保存

细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;400ug/ml G418
传代方法  1:3~1:6传代;每周2~3次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:18,20;D13S317:11,11;D16S539:11,12;D18S51:14,14;D19S433:13,14;D21S11:30,30;D2S1338:21,23;D3S1358:16,16;D5S818:11,12;D6S1043:12,18;D7S820:8,9;D8S1179:10,14;FGA:23,24,25;Penta E:7,12;TH01:6,6;TPOX:9,12;vWA:14,15
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。克必隆 eTS 细菌基因组差减杂交试剂盒7次
卵清蛋白 10g
成纤维细胞生长因子5mL
DNA  EDTA 2Na100g
140628-20双染细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V- 荧光素 488·PI) 20 次
120654A-20 Southern DNA Marker( 生物素 )20 次
石蜡包埋组织 DNAout30 次
动物 RNAout(TRIzol) 100mL
溴化乙锭 (EB)100mg
DNA  Tween 20100mL
CAS56-87-1L- 赖氨酸25g
130532-10EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白10mL
柱式昆虫 RNAout50 次
MQAE( 氯离子荧光探针 )20mg
ATP 硫酸化酶10U
血液 DNAout50 次
Rosetta(DE3)plysS 菌种1mLNA双-(3-二基氨丙基)氨基-2-丙醇胺
BYAKANGELICOL白当归脑26091-79-2
4-Iodobenzonitrile对碘3058-39-7
Methyl isoeugenol异丁香酚93-16-3
Phosphorus tribromide三溴化磷7789-60-8
Sodium 4-propan-2-ylbenzenesulfonate异丙磺酸32073-22-6
Madecassic acid羟基积雪草苷18449-41-7
1-CYCLOHEXYL-3-(2-MORPHOLINOETHYL)CARBODIIMIDE METHO-P-TOLUENESULFONATE1-环已基-2-啉乙基碳二亚胺对磺酸2491-17-0
Bis(trimethylsilyl)acetylene二(三基硅烷基)乙炔14630-40-1
Bismuth nitrate pentahydrate酸铋10035-06-0
Gentiannine秦艽素439-89-4
2-HYDROXYPROPYL ACRYLATE2-丙酸-2-羟基丙基酯999-61-1
Methyl (triphenylphosphoranylidene)acetate氧酰基亚基三基膦2605-67-6
N-FMOC-ETHANOLAMINE2-(N-芴氧羰基氨基)乙醇105496-31-9
1-Bromo-2-chloroethane1-溴-2-乙烷107-04-0
3,4,5-TRIFLUOROBENZONITRILE3,4,5-三134227-45-5
5,6,7,8-Tetrahydro-2-naphthol5,6,7,8-四氢-2-萘酚1125-78-6
DL-2-AMINOADIPIC ACIDDL-a-氨基己二酸542-32-5
Strontium phosphate磷酸锶14414-90-5
SODIUM TETRADECYL SULFATE十四烷基磺酸1191-50-0
Arsenic砷标准溶液7440-38-2
130658-10无机焦磷酸酶 ( 酵母 )10U
120679-1006nt 随机引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL
Western 印迹膜抗体清除剂200mL
过氧化氢酶10mL
DEAE 琼脂糖凝胶 6B25mL

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